一、污染源头大起底！你中招了吗？

👉 设备隐患：培养箱水盘滋生真菌、生物安全柜滤网失效、移液器吸头残留病原体... 这些「死角」最容易被忽视！

👉 操作漏洞：开盖时间过长、手套接触污染表面、培养基配制时带入杂菌... 不良习惯正在给污染「开绿灯」！

👉  材料风险：冷冻细胞解冻时交叉污染、合作方提供的细胞暗藏病原体...「外来户」可能是定时炸弹！

二、专家灵魂拷问：这些错误你犯过吗？

❓ Q1：如何彻底消除污染？

⚠️ 关键看「污染范围」！如果是单个培养皿污染，立刻隔离销毁；要是整个培养箱中招，必须整机灭菌 + 更换水盘！反复污染同一区域？可能是设备故障，建议联系工程师检修！

❓ Q2：细菌 / 真菌 / 酵母污染能救活吗？

💡 原代培养初期可用「三抗组合」（青霉素 + 链霉素 + 真菌抑制剂）紧急处理，但传代 3 次后仍有污染，必须丢弃！记住：舍不得淘汰污染细胞，等于给实验室埋下「定时炸弹」！

❓ Q3：新买的细胞绝对安全吗？

❗ 答案是NO！即使从 ATCC 购买的细胞，也建议先在隔离培养箱中观察 2 周，用 TSY 平板检测确认无污染后再混入主培养体系！

1. 污染区域用70% 乙醇 + 0.1% 次氯酸钠双重消毒
2. 培养箱清空后用臭氧熏蒸 2 小时
3. 所有接触过污染的耗材高压灭菌后丢弃
4. 操作人员更换全套防护装备，重新培训无菌操作！

❓ Q5：清洁后如何验证无菌？

✅ 超简单！用无抗生素 TSY 平板在实验室各角落开盖暴露 1 小时，37℃培养 48 小时后观察：

✨ 0 菌落 = 完美通过

⚠️ 1-3 个菌落 = 局部清洁不到位

🚫 ＞3 个菌落 = 必须重新消毒！

1. 耐药性危机：长期使用导致「超级细菌」诞生
2. 细胞毒性：某些抗生素会抑制细胞生长甚至诱导突变
3. 技术掩盖：用了抗生素就发现不了操作漏洞，最终酿成大祸！

三、2025 最新防控黑科技！

• 生物安全柜：定期检测风速（≥0.38m/s），每半年更换 HEPA 滤网
• 培养箱：使用含真菌抑制剂的无菌水盘，每周高压灭菌更换
• 移液器：选择带滤芯的吸头，防止气溶胶污染

1. 三级防护：手套→护目镜→一次性实验服，层层隔绝病原体
2. 单向流原则：试剂从清洁区向污染区移动，避免交叉
3. 5 秒法则：培养皿开盖后必须在 5 秒内完成操作，超时立刻更换！

四、行业机密：0 污染实验室的终极秘诀！

❗ PIC/S 2025 最新标准要求：

✅ 建立动态污染控制策略（CCS），每月更新风险评估

✅ 灭菌后必须做PUPSIT 测试（过滤器完整性验证）

✅ A 级洁净区全程监控悬浮粒子，发现异常立即停机！

五、这些「雷区」千万别踩！

🚫 用抗生素替代无菌操作

🚫 反复使用未灭菌的移液器吸头

🚫 培养箱水盘直接加自来水

🚫 污染区域和清洁区域混用耗材

关注我，下期揭秘「细胞培养室里的 10 个死亡操作」！

评论区留言「0 污染」，免费领取《实验室无菌操作 SOP 手册》！

# 实验室安全 #生物污染防控 #科研干货