在生命科学研究领域,类器官作为模拟体内器官结构与功能的三维细胞培养体系,正成为疾病建模、药物研发等方向的重要工具。然而,类器官原代构建过程复杂,每一个环节都关乎实验成败。苏州阿尔法生物凭借专业的技术与优质的产品,为科研人员提供完善的类器官原代构建解决方案。
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一、类器官原代构建核心步骤解析
1. 组织预处理:奠定实验基础
使用预冷的组织清洗液对目标组织进行清洗,随后将其移至 6cm 培养皿,细致去除周边脂肪、结缔组织及坏死区域。这一步骤至关重要,去除杂质能有效减少非目标细胞干扰,为后续操作创造良好条件。
2. 组织剪碎:控制组织块大小
将处理后的组织转移至 1.5mL 离心管,用无菌剪刀剪切 100 - 200 下,使组织碎块直径达到 0.5 - 1mm。合适的组织块大小有助于酶解充分,让细胞更好地释放。
3. 精准酶解:把握细胞释放时机
组织悬液离心弃上清后,加入 5mL 酶解液 Ⅰ 重悬并转移至新的 6cm 培养皿,在 37℃培养箱中进行酶解。每 10min 取出吹打并镜下观察,当视野中不再有明显组织块,出现大量单细胞及小细胞团时,即可终止酶解。精确把控酶解程度,既能保证细胞充分释放,又能避免过度酶解损伤细胞。
4. 细胞收集与纯化:获取优质细胞
终止酶解后,通过多次清洗、自然沉降法收集细胞团,并利用 100μm 细胞筛过滤,去除胞外基质杂质。若存在红细胞干扰,还需进行红细胞裂解操作,确保最终收集到的细胞纯度高、活性好。
5. 细胞计数与种胶:科学接种细胞
准确计数细胞后,以 24 孔板为例,按照 10000 - 50000 个 / 50μL 胶滴的密度,将细胞与基质胶等体积混合,快速接种到预热的 24 孔板中心。经过预固化与完全凝固步骤,为细胞营造稳定的三维生长环境。
6. 维持培养:保障类器官生长
胶滴凝固后加入类器官培养基,48h 后更换不含添加物 Ⅰ 的培养基,后续每 2 天更换一次。严格遵循培养周期更换培养基,能为类器官提供充足营养,维持其正常生长与分化。
二、苏州阿尔法生物提供类器官构建优势
1. 优质试剂盒,实验无忧
苏州阿尔法生物提供的类器官构建试剂盒等实验耗材,包含专用组织清洗液、酶解液、类器官培养基及添加物等。所有试剂均经过严格质检,性能稳定,可有效提升类器官构建成功率。例如,培养基中特殊的添加物组合,能促进细胞增殖与分化。
2. 专业技术支持,全程护航
我们拥有专业的技术团队,可为科研人员提供从实验设计到操作实施的全程技术支持。无论是优化实验步骤,还是解决实验中遇到的难题,都能及时响应,助力科研顺利进行。
3. 现货供应,快速响应
常备类器官构建试剂盒现货,支持全国快速发货,缩短科研等待时间。同时,提供灵活的采购方案,满足不同规模实验需求。