HEK293细胞起源

Alex Van der Eb 在 1970 年代培养了 HEK 293 细胞系。为了产生永生化细胞系，Graham 将 5 型腺病毒的 DNA 转染到 HEK 细胞的人类 19 号染色体中。Ad5 整合到细胞基因组中导致细胞凋亡的预防，从而导致细胞系的连续产生。在获得成功之前，Frank Graham 进行了 293 次实验，因此得名 HEK 293。起初，HEK 293 被认为来源于胎儿肾脏的内皮细胞、上皮细胞或成纤维细胞。但最近的证据表明，这些细胞可能起源于神经元胎儿肾细胞。

HEK293细胞大小、基因组和染色体数目

HEK 293 细胞的直径通常在 11-15µm 左右。 

HEK 293 细胞是亚三倍体人细胞系。它们携带 64 条染色体、三个 X 染色体拷贝以及 4 kbp Ad5 掺入 HEK 293 基因组的 19 号染色体，表明细胞遗传学不稳定。

HEK293细胞培养环境要求

HEK293细胞被认为是一种低维护且稳定的细胞系。他们的培养要求通常并不复杂。这些细胞迅速翻倍。它的倍增时间大约是34到36小时。

人胚肾 293 细胞可以贴壁或悬浮培养，但通常这些细胞以贴壁单层培养。 

为了保持 HEK 293 细胞存活，使用了高葡萄糖细胞培养基。培养基应在大约 2-3 天内更换。HEK 293 细胞需要设置在 37°C 的二氧化碳培养箱才能生长。培养箱中的CO2浓度在 5% 作用 。 

在储存 HEK 293 细胞时，它们必须处于液氮气相。避免将细胞储存在 -80°C，因为从长远来看它们会失去活力。细胞解冻后，必须将它们添加到预热的培养基中。以低速离心解冻的细胞以分离冷冻培养基并重新悬浮在生长培养基中。由于细胞中存在腺病毒，HEK 293 的生物安全等级为 BSL-2。

使用 HEK 293 HEK293细胞的优势和局限性

HEK293细胞优势

l 一致的结果和细胞具有高度可重复性

l 高效地大量生产重组蛋白，使其成为开发治疗药物的理想候选者

l 可用于稳定和瞬时基因表达

l 对转染有明显的反应，并且可以在转染中使用不同的化学和物理方法。

HEK293细胞的局限性

l 容易被细菌污染 

l 易受病毒污染

l 培养时间延长会导致细胞健康状况下降

HEK293细胞应用

HEK 293 细胞用于广泛的研究应用。以下是使用 HEK 293 细胞系的一些研究领域：

受体信号

HEK 293 细胞常用于离子通道和细胞膜受体的异源表达。许多研究人员使用这些细胞来研究通常与疾病有关的 G 蛋白偶联受体信号通路。这些细胞还用于表征各种生物体中的嗅觉受体。 

蛋白质生产

如前所述，HEK 293 细胞在大量产生重组蛋白方面异常高效。为此，专家们一直在广泛使用该细胞系。已经使用 HEK 293 细胞开发了几种抗体和功能性蛋白质。

癌症研究

HEK 293 细胞具有致瘤性，常用于癌症研究。在一项研究中，HEK 293 细胞被用来解释二甲双胍在治疗癌症中的作用。研究证实，二甲双胍有助于阻碍细胞迁移和抑制趋化因子白介素 8 的表达。

HEK 293 细胞也经常在涉及测试对癌症特异性细胞的效果的研究中用作对照。最近，这些细胞被用于研究百里醌对乳腺癌影响的研究中。

HEK293细胞开发

HEK 293T 是HEK293细胞系的一种变体，最近已开发出来。这种细胞衍生物携带 SV40 大 T 抗原，使这些细胞能够在含有 SV40 启动子的质粒载体中产生重组蛋白。话虽如此，HEK 293T 广泛用于病毒颗粒生产。比如：慢病毒颗粒，这些病毒颗粒可用于转导非分裂细胞。

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