荧光定量 pcr试剂-天根SYBR Green
天根目录号：FP205
天根试剂盒-FP205特点
1. SuperReal PreMix Plus采用了独特的双组分热启动DNA聚合酶(化学修饰的HotStar Taq
DNA聚合酶和抗体修饰的Anti Taq DNA聚合酶)，从而构成酶活自动调节系统，配合精心
优化buffer体系，具有高扩增效率，高扩增特异性和宽广的可信范围的特点。
2. 本产品Buffer体系平衡了K+和NH4+ 的比例，还特别添加了独特的H-Bond因子, 能协同调整
反应体系中的氢键作用力，使引物模板退火条件更加严谨，反应的专一性增强，重复性
更好。
3. SuperReal PreMix Plus中预混有SYBR Green I，PCR反应液配制时，只需加入模板、引
物、灭菌蒸馏水便可进行Real Time PCR反应，操作简单方便。
4. 本产品附带ROX Reference Dye，用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号
误差，方便客户针对不同型号荧光定量PCR仪时选择对应浓度使用。
试剂盒原理
本产品采用了双组分热启动DNA聚合酶进行PCR扩增，通过检测反应进程中
SYBR Green I的荧光强度，达到检测PCR产物扩增量的目的。
本产品中双热启动酶构成了独特的酶活自动调节系统。酶活自动调节系统是由化学修饰
的HotStar Taq DNA聚合酶和抗体修饰的Anti Taq DNA聚合酶组成。其中HotStar Taq DNA
聚合酶占绝大部分比例，其聚合酶活性的激活是严格依赖于95℃高温的一个缓释过程，而
Anti Taq DNA聚合酶则在95℃高温下完全激活。经过95℃条件下孵育15 min激活大部分
HotStarTaq DNA聚合酶，进入PCR循环后，每经过一轮95℃条件下变性，即可重新激活一
部分HotStar Taq DNA聚合酶。HotStar Taq DNA聚合酶独特的酶活缓释机制使其可以与Anti
Taq DNA聚合酶构成独特的酶活自动调节系统。PCR反应初期，完全激活的Anti Taq DNA聚
合酶可以协同已经激活的HotStar Taq DNA聚合酶达到优化酶活状态，而在整个PCR反应过
程中，每一轮新释放的HotStart Taq DNA聚合酶活力刚好可以弥补因热变性所导致的部分酶
活损失。因此，SuperReal PreMix Plus在整个PCR反应过程始终保持优化的DNA聚合酶活
力，配合精心优化Buffer体系，从而可以获得高扩增效率，高扩增特异性和更加广泛性的模
板适应性。
注意事项
1． PCR反应的预变性条件必须设定为95℃ 15 min，用以充分激活热启动酶。
2．本产品中含有荧光染料SYBR Green I，保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照
射。
3．如果试剂没有混匀，其反应性能会有所下降。使用时请上下颠倒轻轻混匀，请不要使用
振荡器进行混匀，尽量避免出现泡沫，并经瞬时离心后使用。
4．引物纯度对反应特异性影响很大，建议使用PAGE级别以上纯化的引物。
5．引物终浓度为0.3 μM可以在大多数体系中获得良好的扩增结果。如果需要进一步优化，
可以在 0.2-0.5 μM范围内调整引物浓度。
6．20 μl反应体系中，基因组DNA或cDNA模板的使用量一般小于100 ng，逆转录产物作为
模板时，使用量应不超过PCR体系终体积的20%。
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