人脐带间充质干细胞诱导分化试剂盒
HyCyteTM 人脐带间充质干细胞诱导分化试剂盒
Human Umbilical Cord Marrow Mesenchymal Stem Cells Osteogenic Differentiation Kit
货号:UCHX-D101
规格:200 mL/Kit
人脐带间充质干细胞诱导分化试剂盒产品性能稳定,可提高脐带/脐血间充质干细胞成骨/成脂/成软骨诱导效率;
NOTE:
a. 本产品组分均为无菌分装,可直接配制成完全培养基使用;染色液为独立包装组分,请勿与培养基混用。
b. 配制完全培养基前,请瞬时离心各管小剂量试剂以免损失,配制后请在有效期内使用完毕。
c. 完全培养基储存条件:2~8℃,避光;配制后有效期:3 months。
d. 本产品仅用于科研实验,不可用于其他。
成骨诱导步骤
1. 接种诱导细胞:取对数生长期的细胞,按照2×10^4cells/cm2的细胞密度接种至包被后的培养器皿中,于37℃,5% CO2培养环境下培养至汇合度60-70%,弃掉上清,加入成骨诱导分化培养基。
2. 细胞分化诱导:每2-3天更换成骨诱导培养基,于37℃,5% CO2培养环境下培养约14-21天,并注意观察细胞形态变化。根据细胞钙盐结晶析出和钙质结节形成的情况,决定终止细胞诱导的时间,进行染色鉴定。
3. 细胞固定:吸去培养基使用适量1×PBS清洗一次,弃去后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面,室温固定30-60 min,弃去固定液再使用1×PBS清洗两次。
4. 茜素红染色:加入适量茜素红染液染3~5min,吸去茜素红染液,用1×PBS清洗两次,并加入适量1×PBS避免细胞干燥。
5. 诱导评估:显微镜下观察成骨染色效果,并进行图像采集和诱导评估。诱导成功时,钙质结节会与茜素红染料结合后呈现红色或橘红色。