Jurkat-Cas9细胞
细胞名称：Jurkat-Cas9细胞 人T淋巴细胞白血病细胞Cas9稳定表达细胞系
细胞简称：Jurkat-Cas9细胞
产品货号：TCH-C225-M01
修饰基因：Cas9
修饰类型：过表达稳转
转导方法：慢病毒转染
抗性基因：Hygro
细胞鉴定：Q-PCR检测合格
种属来源：人
组织来源：外周血
疾病特征：急性T淋巴细胞白血病
细胞形态：淋巴母细胞样
生长特性：悬浮生长
培养体系：RPMI-1640+10%FBS+1%Glutamax+1% Sodium Pyruvate+1%P/S
传代比例：1:3-1:6，每2-3天换液一次
传代周期：24-48 h
培养条件：气相：95%空气+5%CO2，温度：37℃
冻存条件：60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO，液氮储存
质量检测：细菌、真菌、支原体检测均为阴性
Jurkat-Cas9细胞 是Jurkat-FHCRC细胞株(Jurkat细胞株的衍生)的一个克隆。Jurkat细胞株来源于一个14岁男孩的外周血；经佛波酯和外源凝集素或抗T3单克隆抗体中的一种诱导后可产生大量IL-2(IL-2的产生需两种类型的诱导剂)；表达T细胞受体、CD3。
细胞接收后处理方法
1.运输方式：冻存管（默认发送方式）
① 请在收到细胞后，先检查包装是否完整，干冰是否充足，冻存管有无破损等情况，并核对细胞管上的标签信息，细胞管数是否与发货清单一致。如有异常情况，请及时与我们联系。
② 收到细胞后如不立即进行实验，则请将细胞放至-80℃或液氮中保存。
③ 实验前开启水浴锅并预热培养基，并备好15mL离心管加入5mL预热后的培养基。
④ 将冻存管置于37℃水浴锅内，快速摇动解冻直到内容物融化，同时需注意避免水面没过管口。
⑤ 将冻存管外壁进行常规消毒后，在超净台内小心开盖，尽量避免气泡溢出，轻柔吹打数次，转移至15mL离心管内。使用1 mL培养基清洗冻存管内壁，一并收集至15mL离心管内。
⑥ 250g离心5min，收集细胞沉淀，弃掉上清并加入2mL完全培养基重悬。
⑦ 取20μL细胞悬液至EP管，台盼蓝染色并计数，记录细胞数量和存活率。如有异常请及时与我们联系，如无台盼蓝，可略过该步骤。
⑧ 将重悬后的细胞接种至合适大小的培养器皿中，放置于培养箱内进行培养。
⑨ 24h后镜下拍照并反馈我们，换液后继续培养。
2.运输方式：培养瓶（贴壁细胞）
① 请在收到细胞后，先检查包装是否完整，有无破损漏液的情况，并核对细胞瓶上的标签信息，细胞瓶数是否与发货清单一致。如有异常情况，请及时与我们联系。
② 观察瓶内的培养基是否澄清，镜下观察细胞是否状态良好，并将细胞容器外壁进行常规消毒后，置于培养箱内放置2-3h，让脱壁的细胞可以重新贴附。
③ 小心开盖移去瓶内的培养基，更换为细胞专用的完全培养基，按照培养器皿决定用量。若细胞脱壁过多，可将原培养基离心获得细胞沉淀，再接种回原瓶内。
④ 镜下拍照并反馈我们，如细胞汇合度较低，则放置于培养箱内进行培养。如细胞汇合度达到80%以上，则可按照常规方法进行消化传代。
3.运输方式：培养瓶（悬浮细胞）
① 请在收到细胞后，先检查包装是否完整，有无破损漏液的情况，并核对细胞瓶上的标签信息，细胞瓶数是否与发货清单一致。如有异常情况，请及时与我们联系。
② 观察瓶内的培养基是否澄清，镜下观察细胞是否状态良好，拍照并反馈我们。
③ 将细胞容器外壁进行常规消毒后，置于超净工作台内小心开盖。将瓶内的培养基全部转移至若干50 mL离心管内，并清洗培养瓶内壁一并收集。
④ 250g离心5min收集细胞沉淀，弃掉上清，使用新鲜的完全培养基重悬至合适密度。接种至合适的培养器皿中，置于培养箱内培养。
⑤ 培养24h后观察细胞状态和密度，按照常规方法进行传代。
4.运输方式：血清管
① 请在收到细胞后，先检查包装是否完整，有无破损漏液的情况，并核对细胞管上的标签信息，细胞管数是否与发货清单一致。如有异常情况，请及时与我们联系。
② 收到细胞后请尽快进行实验，如不能及时处理，请将细胞放至常温环境，通常15-25℃为佳，并尽量在24h内完成实验。否则细胞状态和存活率将会受到一定的影响。
③ 血清管悬液可能会呈现一定程度的浑浊状态，这属于正常现象，请放心操作。
④ 将血清管外壁进行常规消毒后，在超净台内小心开盖，尽量避免气泡溢出，轻柔吹打数次，转移至15mL离心管内。
⑤ 吸取1mL 培养基清洗血清管内壁，同样转移至15mL管，并吹打均匀。
⑥ 取20μL细胞悬液至EP管，台盼蓝染色并计数，记录细胞数量和存活率。如有异常请及时与我们联系，如无台盼蓝，可略过该步骤。
⑦ 250g离心5min，收集细胞沉淀，并接种至合适大小的培养器皿中，放置于培养箱内进行培养。
⑧ 24h后镜下拍照并反馈我们，并根据汇合度继续培养或消化传代。
5.运输方式：“细胞胶囊”技术
① “细胞胶囊”包括细胞管和Buffer共2个试剂管。请在收到细胞后，先检查真空包装袋内的“细胞胶囊”管身是否完好，培养液是否外渗，并核对管身上的标签信息，细胞管数是否与发货清单一致。如有异常情况，请及时与我们联系。
② 收到“细胞胶囊”后请尽快进行实验，如不能及时处理，请将细胞放至常温环境，通常15-25℃为佳，并尽量在24 h内完成实验，否则细胞状态和存活率将会受到一定的影响。“细胞胶囊”管内的培养液可能会呈现一定程度的浑浊状态，这属于正常现象，请放心操作。
③ 用75%酒精消毒包装袋表面，在超净台内取出细胞胶囊管和Buffer管，小心的打开细胞胶囊管盖，尽量避免气泡溢出。
④ 使用移液枪将细胞胶囊管中的培养液全部弃去。
⑤ 将Buffer全部加入到细胞胶囊管中，拧紧管盖，上下颠倒3-5 min。
⑥ 观察到细胞胶囊完全溶解后，小心开盖，使用移液枪轻柔吹打数次，转移到15 mL离心管内。
⑦ 取20μL细胞悬液至EP管，台盼蓝染色并计数，记录细胞数量和存活率。如有异常请及时与我们联系。
⑧ 250 g离心4 min，收集细胞沉淀，并接种到合适大小的培养器皿中，放置于培养箱内进行培养。
⑨ 24 h 后显微镜下观察细胞状态，观察细胞时请拍100×、200×各2-3张照片进行留存，所拍照片应尽量清晰，并根据汇合度继续培养或消化传代。
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