HEK293细胞-人胚胎肾细胞
早期报道中指出该细胞基因组中含有腺病毒5(Ad5)基因组的左侧端和右侧端的DNA,但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现,Ad5的1~4344位线性核苷酸整合入细胞染色体19q13.2。HEK293细胞-人胚胎肾细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主。可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体,由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。生物安全级别为2级。
细胞名称:人胚肾细胞
细胞简称:HEK-293
产品货号:TCH-C190
种属来源:人
组织来源:胚肾
疾病特征:/
细胞形态:上皮细胞样
生长特性:贴壁生长
培养体系:DMEM-H+10%FBS+1%P/S
配套培养基货号:TCH-G190
传代比例:1:4-1:8,每2-3天换液一次
传代周期:24-48 h
培养条件:气相:95%空气+5%CO2,温度:37℃
冻存条件:60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO,液氮储存
质量检测:细菌、真菌、支原体检测均为阴性
参考文献:
"Xie QW, et al. Complementation analysis of mutants of nitric oxide synthase reveals that the active site requires two hemes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 4891-4896, 1996. PubMed: 8643499
Da Costa LT, et al. Converting cancer genes into killer genes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 4192-4196, 1996. PubMed: 8633039
Graham FL, et al. Characteristics of a human cell line transformed by DNA from human adenovirus type 5. J. Gen. Virol. 36: 59-72, 1977. PubMed: 886304
Graham FL, et al. Defective transforming capacity of adenovirus type 5 host-range mutants. Virology 86: 10-21, 1978. PubMed: 664220
Harrison T, et al. Host-range mutants of adenovirus type 5 defective for growth in HeLa cells. Virology 77: 319-329, 1977. PubMed: 841862
Bodary SC, McLean JW. The integrin beta 1 subunit associates with the vitronectin receptor alpha v subunit to form a novel vitronectin receptor in a human embryonic kidney cell line. J. Biol. Chem. 265: 5938-5941, 1990. PubMed: 1690718
Goodrum FD, Ornelles DA. The early region 1B 55-kilodalton oncoprotein of adenovirus relieves growth restrictions imposed on viral replication by the cell cycle. J. Virol. 71: 548-561, 1997. PubMed: 8985383"
HEK293细胞-人胚胎肾细胞使用说明书
收到细胞后请务必仔细阅读产品资料,了解细胞相关信息,如贴壁特性 (贴壁/悬浮/半贴壁半悬浮)、细胞形态、培养体系、传代比例和换液频率等。
| T25培养瓶常温运送
1. 收到细胞后,请先检查培养瓶是否完好,培养基是否外渗、浑浊,并核对瓶身上的标签信息、细胞数量是否与发货清单一致。如有异常情况,及时与我们联系。
注:培养瓶内飘浮的小体积絮状物可能是脱落的细胞,对于这种情况,建议在细胞培养箱静置2 h 后再观察,如仍有细胞未贴壁,可收集培养上清离心后再接种到原瓶或新的培养容器中。
2. 用75%酒精消毒细胞培养瓶表面,不要打开培养瓶,将细胞平放于细胞培养箱内静置1~2 h,待细胞恢复基本生长状态后,再进行后续操作。
3. 显微镜下观察细胞状态,观察细胞时请拍摄清晰的100×、200×照片各2~3张留存。
4. 细胞种类不同,细胞的运输液不同。请根据培养瓶上的标识判断培养瓶内培养基是否可以继续使用。
5. 若细胞密度低于80%,请及时更换为预热的完全培养基培养。若细胞密度大于80%,可进行传代。具体见《细胞培养操作说明》。
| 冻存管干冰运送
1. 收到细胞后,请先检查包装是否完整,干冰是否充足,冻存管有无破损等情况,并核对冻存管上的标签信息、细胞管数是否与发货清单一致。如有异常情况,及时与我们联系。
2. 低温保存的细胞非常脆弱,细胞收到后如在24 h内复苏,可存放于-80℃冰箱;超过24 h请存放于液氮中。建议尽快复苏,具体复苏操作见《细胞培养操作说明》。
3. 复苏细胞后,首次换液之前需在显微镜下观察细胞状态,观察细胞时请拍摄清晰的100×、200×照片各2~3张留存。
4. 部分细胞贴壁时间较长,请根据说明书进行操作。若复苏有异常,及时与我们联系。
5. 后续根据细胞汇合度继续培养或消化传代。
| 血清管常温运送
1. 在收到细胞后,请先检查试剂管是否完好,培养基是否外渗,并核对试剂管上的标签信息、细胞管数是否与发货清单一致。如有异常情况,及时与我们联系。
2. 收到细胞后请尽快进行处理,如不能及时处理,请将细胞放至常温环境,通常15~25℃为佳,并尽量在24 h内处理。血清管细胞悬液可能会呈现一定程度的浑浊,属于正常现象,可放心操作。
3. 用75%酒精消毒血清管表面,在洁净工作台内小心开盖,尽量避免气泡溢出,轻柔吹打数次,转移至15 mL离心管中。
4. 吸取1 mL预热的完全培养基清洗血清管内壁,同样转移至15 mL离心管,并吹打均匀。
5. 250 g离心4 min。离心后去除上清,加入适量预热的完全培养基重悬后接种至合适大小的培养容器中,放置于培养箱内进行培养。
6. 首次换液前需在显微镜下观察细胞状态,观察细胞时请拍摄清晰的100×、200×照片各2~3张留存。
7. 后续根据汇合度继续培养或消化传代。具体见《细胞培养操作说明》。
| 细胞胶囊技术
1. “细胞胶囊”包括细胞管和溶解Buffer共2个试剂管。收到细胞后,请先检查试剂管是否完好,培养基是否外渗,并核对管身上的标签信息、细胞数量是否与发货清单一致。如有异常情况,及时与我们联系。
2. 收到“细胞胶囊”后需尽快处理, 如不能及时处理, 请将细胞放至常温环境, 通常15~25℃为佳,并尽量在24 h内处理。“细胞胶囊”管内的液体肉眼观察可能会呈现一定程度的浑浊,这属于正常现象,可放心操作。
3. 用75%酒精消毒试剂管表面,在洁净工作台内小心的打开细胞胶囊管盖,尽量避免气泡溢出。
4. 小心弃去细胞胶囊管中的全部液体。
5. 将溶解Buffer全部加入到细胞胶囊管中,拧紧管盖,上下颠倒3~5 min。观察到球状的细胞胶囊完全溶解后,小心开盖,使用移液枪轻柔吹打数次,将所有液体转移到15 mL离心管内。
7. 250 g离心4 min。离心后去上清,加入适量预热完全培养基重悬后,将细胞悬液接种到合适大小的培养容器中(T25瓶或6cm皿),放置于细胞培养箱中培养。
8. 首次换液前需在显微镜下观察细胞状态,观察细胞时请拍摄清晰的100×、200×照片各2~3张留存。如有异常情况,及时与我们联系。
9. 后续根据细胞汇合度继续培养或消化传代。具体见《细胞培养操作说明》。