苏州阿尔法生物实验器材有限公司

蛋白组学试剂

蛋白纯化层析填料与蛋白纯化试剂——从粗提到高纯度的一站式解决方案

蛋白纯化是重组蛋白表达、抗体制备、结构生物学及功能研究的核心环节。层析填料(Chromatography Resin)作为蛋白纯化的关键耗材,其选择直接决定了纯化效率、蛋白活性回收率及最终纯度。苏州阿尔法生物作为苏州工业园区专业生命科学试剂供应商,提供涵盖亲和层析、离子交换层析、分子筛(凝胶过滤)层析、疏水层析、金属螯合层析等主流技术路线的全系列层析填料及配套纯化试剂,覆盖从捕获(Capture)到精细纯化(Polishing)的完整工作流程。

为什么选择我们的蛋白纯化产品?

  • 全技术路线覆盖:从Ni-NTA亲和捕获到分子筛精细纯化,一站式配齐所有层析步骤所需填料
  • 多品牌可选:提供Cytiva(GE Healthcare)、Thermo Fisher、Bio-Rad、默克、纳微科技、博格隆等国内外主流品牌,满足不同预算和实验精度需求
  • 高载量与高回收率:Ni-NTA填料His标签蛋白载量≥20mg/mL凝胶,抗体纯化Protein A/G填料载量≥30mg IgG/mL,确保高产量
  • 良好的批间一致性:严格质控确保每批次填料性能稳定,满足工艺放大及重复性要求
  • 苏州本地现货供应:常规填料苏州仓库现货,今天下单明天到,支持小包装试用

蛋白纯化层析填料与试剂全品类一览

产品类型 代表型号/品牌 纯化原理 目标蛋白/应用场景 关键参数
Ni-NTA亲和层析填料 Cytiva Ni-NTA、QIAGEN Ni-NTA、纳微 Ni-6FF 固定化金属螯合亲和层析(IMAC) His标签(6×His)重组蛋白捕获纯化 载量≥20mg His蛋白/mL凝胶;适用pH 2-14
Ni-IDA亲和层析填料 Bio-Rad Bio-Scale Mini Ni-IDA 亚氨基二乙酸螯合镍离子 His标签蛋白纯化,比Ni-NTA洗脱更温和,杂质蛋白更少 载量10-15mg/mL;非特异性吸附更低
GST标签纯化填料 Cytiva GSTrap FF、Bio-Rad Bio-Globin GST 谷胱甘肽(GSH)亲和层析 GST融合标签蛋白一步纯化 载量≥10mg GST蛋白/mL;结合缓冲含还原型谷胱甘肽
Strep-tag/MBP/Flag标签纯化填料 IBA Strep-Tactin、NEB MBP纯化树脂 特异性配体-标签亲和结合 Strep-tag II、MBP、Flag等标签融合蛋白高特异性纯化 洗脱条件温和,保留蛋白天然活性
Protein A亲和层析填料 Cytiva MabSelect SuRe、Repligen rProtein A Protein A与IgG Fc段特异性结合 单克隆抗体、抗体片段(scFv/Fab)纯化 载量≥30mg IgG/mL;耐碱清洗(0.5M NaOH)
Protein G/L亲和层析填料 Thermo Fisher ProSep vA Ultra、Cytiva Protein G HP Protein G/L与IgG结合,对亚类覆盖更广 小鼠/兔/人源多克隆及单克隆抗体制备纯化 Protein G对小鼠IgG1亲和力更强;Protein L仅结合轻链
阳离子交换层析填料(CM/SP) Cytiva SP Sepharose FF、Bio-Rad Nuvia cS 带负电基团结合带正电蛋白 蛋白精细纯化、去除内毒素及核酸杂质 CM为弱阳离子(pH 4-7);SP为强阳离子(pH 4-10)
阴离子交换层析填料(DEAE/Q) Cytiva DEAE Sepharose FF、Q Sepharose HP 带正电基团结合带负电蛋白 蛋白精细纯化、核酸去除、抗体阴离子交换步骤 DEAE为弱阴离子(pH 6-9);Q为强阴离子(pH 2-12)
分子筛/凝胶过滤层析填料 Cytiva Superdex 75/200 Increase、Sephadex G-25 按分子量大小分离 蛋白脱盐、缓冲液置换、寡聚体/聚集体分析、分子量测定 Superdex 75适用于10-70kDa;200适用于10-600kDa蛋白
疏水层析填料(HIC) Cytiva Butyl Sepharose 4 FF、Phenyl Sepharose HP 高盐条件下结合蛋白疏水区域 抗体聚集体去除、蛋白精细纯化(常作为第三步Polishing) 丁基疏水性较弱适合敏感蛋白;苯基疏水性更强
脱盐柱/脱盐试剂盒 Zeba Spin脱盐柱(Thermo)、HiTrap Desalting(Cytiva) 凝胶过滤快速脱盐 小体积样品(0.5-5mL)快速脱盐换液,去除游离标记染料 5分钟内完成脱盐;盐去除率≥95%
Protein A/G磁珠 Thermo Dynabeads Protein A/G、Cytiva Monarch Protein A 磁性微球表面偶联Protein A/G 小体积样本抗体快速免疫沉淀、Co-IP实验、抗体筛选 磁珠粒径2-4μm;结合量≥10μg IgG/mg磁珠
免疫沉淀(IP)填料 Protein A/G琼脂糖、FLAG M2亲和凝胶 抗体-抗原特异性识别 蛋白-蛋白相互作用研究(Co-IP)、ChIP实验、蛋白功能验证 低非特异性吸附;适用于天然或变性条件
标签蛋白纯化试剂盒 His-tag纯化试剂盒、GST纯化试剂盒(全式金/天根/碧云天) 预装柱+缓冲液套装 实验室小规模His/GST标签蛋白快速纯化,新手友好 含预装Ni-NTA/GSH柱+结合/洗涤/洗脱缓冲液
BCA蛋白定量试剂盒 碧云天BCA试剂盒、Thermo Pierce BCA、诺唯赞BCA BCA法(二喹啉甲酸法)比色定量 纯化后蛋白浓度快速准确定量,兼容去垢剂和还原剂 线性范围20-2000μg/mL;96孔板法最小样本量1μL
Bradford蛋白定量试剂盒 碧云天Bradford试剂盒、Bio-Rad蛋白定量试剂盒 考马斯亮蓝G-250染料结合法 蛋白浓度快速定量,操作简便、速度快(5分钟出结果) 线性范围1-1500μg/mL;不耐碱性缓冲液和去垢剂


典型应用场景

  • 重组蛋白表达纯化:Ni-NTA/GST标签纯化填料一步捕获 → 离子交换层析精细纯化 → 分子筛脱盐/聚集体去除,获得高纯度活性蛋白用于酶学、结构生物学(X射线晶体学/Cryo-EM)研究
  • 单克隆抗体制备:Protein A/G亲和层析捕获 → 低pH病毒灭活 → 离子交换/疏水层析去除聚集体和杂质 → 病毒过滤及超滤浓缩,符合生物制药GMP级纯化工艺要求
  • 蛋白-蛋白相互作用研究:Protein A/G磁珠或免疫沉淀填料偶联特异性抗体 → Co-IP捕获互作蛋白复合体 → Western Blot或质谱鉴定互作蛋白
  • 多克隆抗体制备与纯化:血清/腹水经Protein A/G填料纯化 → 获得高纯度IgG抗体 → 用于Western Blot、ELISA、免疫组化等下游实验
  • 蛋白定量与质控:BCA/Bradford蛋白定量试剂盒对纯化各阶段蛋白浓度进行准确定量,评估纯化回收率和纯度

如何选择适合的蛋白纯化填料?

  • 按标签类型选捕获填料:His标签首选Ni-NTA(高载量)或Ni-IDA(高特异性);GST标签选GSTrap/GSH填料;无标签蛋白需先构建标签或使用非标签纯化策略
  • 按蛋白性质选精细纯化填料:等电点偏碱性选阳离子交换(CM/SP),偏酸性选阴离子交换(DEAE/Q);聚集体问题选分子筛或疏水层析
  • 按样本规模选规格:小量筛选( <1mg蛋白)选预装柱/试剂盒;中试放大(10-100mg)选1mL预装柱或散装填料自制柱;工艺生产(g级)选工业级散装填料
  • 按下游要求选纯度等级:基础研究选标准级填料;生物制药/临床前研究选GMP级或高纯度级填料(如MabSelect SuRe)

2026年蛋白纯化技术趋势

  • 多模式层析填料(Mixed-Mode)崛起:如Cytiva Capto adhere、Bio-Rad Nuvia cS等将离子交换+疏水作用结合于一体,减少纯化步骤、提高回收率,成为抗体纯化新工艺主流
  • 连续层析与自动化纯化平台:AKTA pure系列及国产自动化纯化系统支持连续流层析(MCC/SMB),大幅提升填料利用率并降低缓冲液消耗,适合工艺放大与GMP生产
  • 一次性层析柱与预装柱普及:一次性使用预装柱避免交叉污染和清洗验证成本,在生物制药CMC工艺开发中快速普及
  • 国产填料加速替代进口:纳微科技、博格隆、利穗科技等国产层析填料性能已达国际水平,价格优势明显,在抗体药物及重组蛋白生产中加速替代Cytiva/Bio-Rad进口产品
碧云天试剂-非变性PAGE蛋白上样缓冲液-P0016

碧云天试剂-非变性PAGE蛋白上样缓冲液-P0016

碧云天试剂-非变性PAGE蛋白上样缓冲液-P0016是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。本产品中不含SDS等变性试剂,但含有还原性试剂DTT。
碧云天生物-SDS-PAGE蛋白上样缓冲液-P0015

碧云天生物-SDS-PAGE蛋白上样缓冲液-P0015

碧云天P0015SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(SDS-PAGESampleLoadingBuffer,5X),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。可以用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。
碧云天  BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)

碧云天 BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)

BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)是BCA蛋白定量常用的试剂。
碧云天-P0010-BCA蛋白浓度测定试剂盒增强型

碧云天-P0010-BCA蛋白浓度测定试剂盒增强型

碧云天-P0010-BCA蛋白浓度测定试剂盒增强型是根据常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成,实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和高兼容性。
碧云天BCA蛋白定量试剂盒P0009

碧云天BCA蛋白定量试剂盒P0009

碧云天BCA蛋白定量试剂盒P0009蛋白浓度测定试剂盒(增强型)(EhacedBCAProteiAayKit)是根据常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成,实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和兼容性。
碧云天 BCA试剂盒蛋白浓度测定试剂盒P0012

碧云天 BCA试剂盒蛋白浓度测定试剂盒P0012

碧云天BCA蛋白浓度测定试剂盒P0012每个试剂盒可以检测5000个样品。
碧云天PBS-C0221A

碧云天PBS-C0221A

碧云天PBS(PBS磷酸缓冲液),含135mMNaCl,4.7mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMNaH2PO4,pH值为7.3±0.1。本PBS缓冲液经过除菌处理,可以直接用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途。
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