碧云天BCA蛋白定量试剂盒P0009蛋白浓度测定试剂盒(增强型)(EhacedBCAProteiAayKit)是根据常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成,实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和兼容性。
碧云天BCA蛋白浓度测定试剂盒P0009 简介
碧云天BCA蛋白定量试剂盒P0009(增强型)(Enhanced BCA Protein Assay Kit)是根据常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成,实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和兼容性。
产品编号 |
产品名称 |
产品包装 |
目录价 |
P0009 |
BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) |
5000次 |
1726.00元 |
P0010 |
BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) |
500次 |
375.00元 |
P0010S |
BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) |
200次 |
196.00元 |
BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20、60、80。但本试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇(DTT)低于1mM,β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于0.01%。不适用BCA法时建议试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。
图1. BCA蛋白定量试剂盒蛋白标准曲线的效果图。左上图为加入BCA工作液后37℃分别孵育30、60和120分钟后的吸光度实测效果图,右图为37℃孵育60分钟时的实拍显色效果图。图中数据仅供参考,实际的检测效果可能会略有不同。
BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)对样品中各种物质的详细的兼容性和普通的BCA蛋白浓度测定试剂盒相同, 每个试剂盒可以检测5000个样品。
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
P0009-1 |
BCA试剂 A |
500ml×2 |
P0009-2 |
BCA试剂 B |
30ml |
P0009-3 |
蛋白标准(BSA) |
30mg×2 |
P0009-4 |
蛋白标准配制液 |
5ml |
— |
说明书 |
1份 |
室温保存。蛋白标准配制成溶液后-20℃冻存。
注意事项:
需酶标仪一台,测定波长为540-595nm之间,562nm最佳。需96孔板。如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但测定时,需根据比色皿的最小检测体积,适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积,样品和标准品的用量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景,请试用碧云天生产的
Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。
为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热,但是切勿过热。
EDTA浓度必须小于10mM,不兼容EGTA。不适用BCA法时,请试用碧云天生产的 Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
碧云天BCA蛋白定量试剂盒P0009使用说明:
1.蛋白标准品的准备
a.取1.2ml蛋白标准配制液加入到一管蛋白标准(30mg BSA)中,充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准溶液。配制后可立即使用,也可以-20℃长期保存。
b.取适量25mg/ml蛋白标准,稀释至终浓度为0.5mg/ml。例如取20μl 25mg/ml蛋白标准,加入980μl稀释液即可配制成0.5mg/ml蛋白标准。蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。稀释后的0.5mg/ml蛋白标准可以-20℃长期保存。
2.BCA工作液的配制
根据样品数量,按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液,充分混匀。例如5mlBCA试剂A加100μl BCA试剂B,混匀,配制成5.1ml BCA工作液。BCA工作液室温24小时内稳定。
3.蛋白浓度检测
a.将标准品按0、1、2、4、8、12、16、20μl加到96孔板的标准品孔中,加标准品稀释液补足到20μl,相当于标准品浓度分别为0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。
b.加适当体积样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足20μl,加标准品稀释液补足到20μl。请注意记录样品体积。
c.各孔加入200μl BCA工作液,37℃放置20-30分钟。
注: 也可以室温放置2小时,或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或适当延长孵育时间。
d.用酶标仪测定A562,或540-595nm之间的波长的吸光度。
e.根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品的蛋白浓度。
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
P0006 |
Bradford蛋白浓度测定试剂盒 |
1000次 |
P0006C |
Braford蛋白浓度测定试剂盒(去垢剂兼容型) |
800次 |
P0007 |
蛋白标准(5mg/ml BSA) |
1ml |
P0009 |
BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) |
5000次 |
P0010 |
BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) |
500次 |
P0010S |
BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) |
200次 |
P0011 |
BCA蛋白浓度测定试剂盒 |
5000次 |
P0012 |
BCA蛋白浓度测定试剂盒 |
500次 |
P0012S |
BCA蛋白浓度测定试剂盒 |
200次 |