移液器准确度直接关系到实验的成败,移液器的使用小技巧有哪些?
小编提供一下几种使用过程中提高移液准确度的小技巧可供参考。
1. 预润湿移液器吸头
当您从移液器分配液体时,吸头上会留下一层液体,这使得分配的体积略小于移液器上显示的体积。移液前预先润湿吸头有助于提高准确度。要预先润湿您的吸头,请将液体吸入移液器,然后将其分配回原来的容器中。涂层在尖端。现在,当您再次吸取液体并将其分配到接收容器中时,没有任何液体会留在吸头上并因润湿而流失。这仅推荐用于大于 10 µL 的体积。
2. 反向移液
在移取粘性液体或挥发性溶剂时使用此技术。在移取 0.5 µL 或更少的超微量样品时,反向移液也有帮助。将活塞向下推至吹扫位置(第二个停止位置),然后向上吸取液体。此时吸头中的液体过多。但是,当通过将活塞推到吸液位置(第一个停止位置)来分配液体时,多余的液体会留在吸头内。使用这种方法,尖端是 “自动”预润湿的。额外的液体在移取挥发性溶剂时也有帮助,因为一些溶剂会蒸发到气垫中。
3. 考虑环境温度
校准移液器的个人或公司可能是在室温下进行的。如果您在不同的温度下工作(例如在冷藏室),那么您的移液器将显示准确的体积读数。
4. 考虑样品温度
在2007 年 Nature Methods 出版物中, Millet 和 Barthlen 观察到一个奇怪的现象。当重复移取冷样品时,初次分配的体积总是比预期的大,但随后用相同的吸头移液得到了正确的体积。热样品也是如此,只是初次 分配的体积比预期的要小。
他们的解决方案很简单——为了准确移液,将初始体积分装回原始容器,然后开始移液。
5. 使用灵敏的移液器来分配您想要分配的体积
随着分配体积接近移液器可以处理的min值,移液器的使用准确度会降低。比如,如果您要分配 15 µL,那么 1 mL 移液器会很糟糕,200 µL 移液器不太好,而 20 µL 移液器则是理想的。
6. 使用尽可能大的容量
大体积比小体积更容易准确移液。假设您正在执行一项必须吸取 5 µL 的检测。准确地移取这么少的量并不容易,并且可能会导致结果中的统计错误。而您如果将储备溶液稀释 10 倍,然后吸取 50 µL 溶液。此时就可以轻松准确地移取该数量,从而减小误差。
7. 称量验证法
分析天平比任何移液器都准确。为获得最大准确度,可以尝试使用移液器来分配您需要的体积,但将其放入天平上的称重容器中。然后,根据质量计算实际移液体积(使用公式体积 = 质量 /密度)。当然,这只适用于已知密度的溶液——比如密度为1的水溶液。
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