酶切实验切不开,多酶切错切,快速内切酶5-15分钟精准解决的秘诀

苏州酶切提速5分钟！阿尔法生物快切酶Golden Gate从质粒构建到蛋白表达专治克隆难题

来源：快速限制性内切酶品牌选购指南时间：2025-10-11

还在为酶切耗时长、多酶切兼容性差头疼？或是被难溶蛋白表达、复杂序列克隆卡进度？别急 —— 苏州阿尔法生物新一轮 “科研利器” 已就位

通用Buffer，5分钟快切：告别多酶切缓冲液繁琐操作，本文深度解析酶切不完全、错切原因，并推荐高效稳定的快速限制性内切酶产品，助您提升分子克隆效率。

从 5 分钟速切的 LightNing® 快速限制酶，到适配难克隆序列的 Golden Gate 组装试剂盒，再到覆盖多场景的无细胞蛋白合成系统，本次新品横跨快速限制酶、切刻内切酶、特色 RNA 酶、蛋白合成、修饰克隆五大核心品类，精准解决实验中的效率瓶颈与技术难点。

接下来，带您逐一解锁这些能 “加速实验流程、降低操作门槛” 的新工具！

百时美新产品

一、LightNing® 快速限制性内切酶新成员

仅新增 1 款，核心优势为 “快速酶切 + 高兼容性”。

产品名称：LightNing® Bsh1236I (BstUI)
关键参数：最适反应温度 37℃；同裂酶包括 BstUI、BspFNI、BstFNI、AccII；酶切位点未明确标注。
核心特点：
1. 通用缓冲液兼容，在 CutOne® 或 CutOne® Color Buffer 中活性优良，多酶切便利。
2. 酶切速度快，5~15 分钟可完成，且星号活性低。
3. 支持一管化反应，百时美去磷酸化、连接试剂在 CutOne® Buffer 中均呈 100% 活性。

二、常规限制性内切酶新成员

新增 4 款，覆盖不同酶切需求，含特殊识别序列与应用场景。

产品名称	类型	最适温度	缓冲液特性	核心信息
PciI	Type IIP	37℃	专属 Cut Buffer C（快速酶切）；CutOne® Buffer 中活性 50%（可双酶切）	来源柠檬色动性球菌；同裂酶 PscI；酶切位点未明确标注
BbvCI	Type IIA	37℃	兼容 CutOne® Buffer（可与 LightNing® 系列双酶切）	异源二聚体（两独立催化亚基）；识别非回文序列 CCTCAGC (-5/-2)，产 5' 端 3 碱基粘性末端
XmnI	Type IIP	37℃	Cut Buffer C 中性能最佳（控星号活性）；兼容 CutOne® Buffer（可双酶切）	来源木薯萎蔫病黄单胞菌；切割 GAANN/NNTTC（平末端）；同裂酶 PdmI、MroXI
ApeKI	Type IIP	75℃	-	来源超嗜热需氧古生菌；切割 G/CWGC（3 碱基粘性末端）；GBS 技术首选酶，用于遗传研究、进化分析等

三、切刻内切酶新成员

新增 2 款，核心功能为 “单链切割”，适配特定扩增技术。

产品名称：Nb.BbvCI、Nt.BbvCI（二者酶切位点均未明确标注）
共同特点：仅切割双链 DNA 中的一条链，产单链 5' 磷酸和 3' 羟基末端（形成 “切刻”）。
核心应用：支持切口酶扩增反应（NEAR），37~42℃恒温扩增，特点为 “快（最快 5 分钟出阳性）、灵（单拷贝可检测）、准（高特异性）”，用于病原体检测、基因表达分析。

四、特色酶：RNase GG

首款特异性切割 RNA-GG 位点的内切酶，适配复杂 RNA 分析。

作用对象：仅切割 RNA 中的 GG 位点，不切割 ssDNA、dsDNA；可高效切割二级结构处的 GG 位点。
关键特性：
1. 耐高温，37~95℃均有活性，60~70℃活性最佳。
2. 活性不依赖金属离子，兼容多数 RNA 研究缓冲液。
核心用途：mRNA 分析等。

五、无细胞蛋白合成试剂盒新成员

新增 6 款，基于大肠杆菌系统，覆盖不同蛋白表达需求。

核心原理：用细胞裂解液保留核糖体、翻译因子等活性，体外实现 “DNA/RNA 模板→功能蛋白” 转化；支持 T7 启动子，适配环状质粒、线性 DNA、mRNA 模板。
产品分型：
1. 基础款：常规蛋白产量最高。
2. Pro 款：适配难溶蛋白表达。
3. Max 款：适配富含二硫键蛋白表达。
4. 冻干版本：同步推出，便于储存与使用。

六、修饰与克隆家族新成员

新增 2 款，聚焦 “核酸连接” 与 “多片段组装”。

T4 RNA Ligase 1
- 来源：T4 噬菌体；ATP 依赖性连接酶，催化单链核酸（RNA/DNA）的 5'- 磷酸与 3'- 羟基连接（伴随 ATP 水解）。
- 连接效率：ssRNA-ssRNA ＞ ssRNA-ssDNA ＞ ssDNA-ssDNA。
- 用途：RNA 环化、RNA 文库构建、RNA 3' 末端标记（需 5'/3' 双磷酸化单核苷酸）。
Golden Gate Assembly Kit (BsmBI)
- 核心组件：Type IIS 型限制酶（BsmBI）+ T4 DNA Ligase。
- 原理：Type IIS 酶识别非回文序列，在识别位点外切割（可定制粘性末端），实现片段无缝连接。
- 特点：支持 10 个及以上 DNA 片段组装；恒温反应（无需变温）；稳定性好；适配重复序列、高 GC 序列、超短序列（＜100 bp）等难克隆序列。

快切酶，限制性内切酶选购指南

产品家族	产品名称	核心类型 / 属性	关键参数（温度 / 缓冲液 / 位点）	核心优势 / 用途
LightNing® 快速限制酶	LightNing® Bsh1236I	快速限制性内切酶	37℃；CutOne®/CutOne® Color Buffer；同裂酶：BstUI/BspFNI/BstFNI/AccII；酶切位点未标注	5-15 分钟快速酶切，低星号活性；支持 “酶切 - 修饰 - 连接” 一管化，多酶切兼容
常规限制酶	PciI	Type IIP 型	37℃；专属 Cut Buffer C（快速）/CutOne® Buffer（活性 50%）；同裂酶：PscI；酶切位点未标注	重组自柠檬色动性球菌，可双酶切
	BbvCI	Type IIA 型（异源二聚体）	37℃；CutOne® Buffer；识别非回文序列 CCTCAGC (-5/-2)，产 5' 端 3 碱基粘性末端	两独立催化亚基；可与 LightNing® 系列双酶切
	XmnI	Type IIP 型	37℃；Cut Buffer C（最佳）/CutOne® Buffer；切割 GAANN/NNTTC（平末端）；同裂酶：PdmI/MroXI	重组自木薯萎蔫病黄单胞菌，控星号活性，可双酶切
	ApeKI	Type IIP 型	75℃；无特定缓冲液标注；切割 G/CWGC（3 碱基粘性末端）；同裂酶：TseI	GBS 技术首选酶；用于动植物遗传研究、群体进化分析、功能基因定位
切刻内切酶	Nb.BbvCI	单链切割酶	未标注温度；无缓冲液标注；酶切位点未标注	仅切双链 DNA 一条链（产切刻）；支持 NEAR 反应（37-42℃，5 分钟快检，单拷贝灵敏）
	Nt.BbvCI	单链切割酶	未标注温度；无缓冲液标注；酶切位点未标注	同上，用于病原体检测、基因表达分析
特色酶	RNase GG	RNA 内切酶	37-95℃（60-70℃最佳）；不依赖金属离子；仅切 RNA 中 GG 位点（不切 ssDNA/dsDNA）	首款 GG 位点特异性酶；可切 RNA 二级结构；用于 mRNA 分析
无细胞蛋白合成试剂盒	基础款	大肠杆菌系统（T7 启动子）	适配模板：环状质粒 / 线性 DNA/mRNA	常规蛋白产量最高
	Pro 款	大肠杆菌系统（T7 启动子）	适配模板：环状质粒 / 线性 DNA/mRNA	专为难溶蛋白表达设计
	Max 款	大肠杆菌系统（T7 启动子）	适配模板：环状质粒 / 线性 DNA/mRNA	专为富含二硫键蛋白表达设计
	冻干版	大肠杆菌系统（T7 启动子）	适配模板：环状质粒 / 线性 DNA/mRNA	便于储存与运输，保留上述对应版本功能
修饰与克隆家族	T4 RNA Ligase 1	ATP 依赖性连接酶	无温度标注；催化单链核酸连接；连接效率：ssRNA-ssRNA＞ssRNA-ssDNA＞ssDNA-ssDNA	用于 RNA 环化、RNA 文库构建、RNA 3' 末端标记
	Golden Gate Assembly Kit (BsmBI)	Type IIS 酶 + T4 连接酶	恒温反应（无需变温）；Type IIS 酶切割识别位点外序列（可定制粘性末端）	支持 10+DNA 片段无缝组装；适配重复 / 高 GC / 超短（＜100bp）难克隆序列

一、LightNing® 快速限制性内切酶新成员

二、常规限制性内切酶新成员

三、切刻内切酶新成员

四、特色酶：RNase GG

五、无细胞蛋白合成试剂盒新成员

六、修饰与克隆家族新成员

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