细胞外囊泡(EV)是一种从所有细胞类型中释放的脂质双层纳米颗粒。它们充当细胞信使,具有基于它们来源的细胞的特定货物和特征。EV的特性由产生它的细胞的生理状态决定,而这些EV反过来又可以改变其他细胞的功能和生理学。
EV在生命科学研究中扮演着重要角色。由于它们作为天然信使的作用,EV已成为许多研究的焦点,研究它们作为疾病生物标志物以及药物和核酸复合物(例如CRISPR-Cas9)载体的潜力。与合成载药囊泡相比,细胞外囊泡表现出多种优势。与合成载体(例如脂质体)相比,EV(例如外泌体)可以通过避免单核细胞的吞噬作用在循环中持续更长时间。此外,与合成药物载体不同,它们可能会产生一定的毒性,而EV对人体几乎没有副作用。与合成载体相比,EV还更容易避免内体途径和溶酶体降解,从而可以更好地递送脆弱的货物,例如siRNA或CRISPR复合物。
EV通过其携带的细胞特异性膜结合蛋白对其来源的细胞类型表现出特异性,从而允许一定程度的细胞归巢以在体内递送药品。来自不同细胞的EV可以被设计为对其他细胞表现出特异性,例如用于药物输送的癌细胞。EV还能够携带药物穿过血脑屏障——即使是那些本身无法通过大脑的药物。EV携带的货物——蛋白质和核酸,尤其是miRNA——也使它们成为标记物的宝贵来源。
除了其在生物医学领域的应用,EV在环境监测、农业领域、能源生产等方面也有潜在应用。例如,EV可以用于监测环境中的污染物质,如重金属和农药。在农业领域,EV可以用于检测农产品中的病原体和营养成分。在能源生产方面,EV可以被用作高效的储能材料。
细胞外囊泡(EV)的分离方法有多种,以下是其中几种常用的方法:
1. 离心机离心法:利用EV的密度比细胞小的特点,细胞培养液通过高速离心机进行离心,将EV沉淀在离心管底部,从而分离出细胞外囊泡。
2. 过滤法:利用EV的大小比细胞小的特点,使用0.22微米的过滤膜将细胞培养液中的细胞和EV分离开来。
3. 免疫磁珠法:利用EV表面标记的特异性抗体与磁珠结合,将EV吸附到磁珠上,然后通过磁性分离EV。
4. 凝胶过滤法:利用EV的大小比蛋白质小的特点,使用凝胶过滤将蛋白质和EV分离开来。
5. 层析法:利用EV的大小比蛋白质小的特点,使用层析法将蛋白质和EV分离开来。
6. 电泳法:利用EV的大小比蛋白质小的特点,使用电泳法将蛋白质和EV分离开来。
以上方法可以单独使用或组合使用,以达到更好的分离效果。不同的分离方法适用于不同类型的EV和不同的研究需求。在选择分离方法时,需要根据具体情况进行综合考虑。
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