移液器俗称移液枪,是一种用于液体处理的实验室仪器的,广泛应用于生物学、化学、医学、食品、石油化工等领域,由于它所处理的液体可以精确到UL,所以也常被称为微量移液器,那么如何正确使用微量移液器?下面小编归纳一下移液器的正确使用方法和移液器校准保养方法,记得收藏备用。
一、如何正确使用微量移液器
一个完整的移液循环,包括吸头安装——容量设定——吸液放液——卸去吸头等步骤。每一个步骤都有需要遵循的操作规范。
1、吸头安装
对于单道移液器,移液器末端垂直插入吸头,轻压左右微微转动即可上紧;
对于多道移液器,移液器的第一道对准第一个吸头,倾斜插入,前后稍许摇动上紧即可。
不可反复撞击移液器来确保吸头气密性,长期以这种方式装配吸头,会导致移液器的零部件因强烈撞击而松散,甚至会导致调节刻度的旋钮卡住。
2、移液器量程的选择和容量设定
量程设定原则:从大体积调节至小体积时,逆时针旋转至刻度即可;从小体积调节至大体积时,可先顺时针调过设定体积,再回调至设定体积,可保证最佳的精确度。不可将调节旋钮旋出量程范围外,否则会损坏移液器内机械装置。
① 移液范围选择在满量程的 35% 到 100% 时,可以保证较好的准确性和重复性。选择合适的量程可以提高 1% 移液精度!尽量避免将移液器量程设置为MAX值的 10% 以下。
② 设定齿轮控制的移液器量程时,始终保持「下调」到所需量程,当由小量程调节到大量程时,旋转调节旋钮到达超过所需量程 1/3 圈处,然后回调到所需量程准确位置,这样能够减少机械回冲或者齿轮滑动带来的影响。
3、吸液和放液
吸液移液器按钮按至第一档,释放按钮,进行吸液。切记不能过快,否则液体进入吸头过快会导致液体倒吸入移液器内部。
放液:紧贴容器壁,先按到第一档,略作停顿,再按至第二档排除余液。移液器吸液操作需要注意以下几点:
浸入的深度和角度
将吸头浸入合适的深度可以提高 5% 的准确性。吸头浸入太深会导致吸液偏多,相反,浸入太浅,会吸入空气。
各种型号规格的移液器推荐的吸头浸入深度如下所示:
规格 |
浸入深度 |
2~10 μL |
1~2 mm |
20~200 μL |
2~3 mm |
200~2,000 μL |
3~6 mm |
2,000 μL 以上 |
6~10 mm |
② 手持移液器的角度也会影响准确性。保证吸液或排液时偏离垂直不超过 20°,可以提高 2.5% 的准确性。
B.润洗:
润洗是一种快速,简单的提升移液准确性高达 0.2% 的方法。 为什么呢?因为液体可能会在吸头内壁上残留形成液体薄膜,这样所得的错误值将小于理论值。想要获得更好的移液精度,可以在安装新吸头后, 用相同样品对吸头进行 2~3 次润洗,这样薄膜会保持相当的恒定,从而提高移液的准确性和重复性。
C.吸液
保证吸液的一致性可以提高 5% 的准确性。移取不同样品时,使用一致的移液节奏,按压或释放按钮的速度平稳一致,到达第一停止点的用力应保持一致。快速或不平稳的吸液会使液体喷溅、产生气雾、套柄污染以及样品量损失。
D.分液
良好的分液技巧也能提高 1% 的准确性。分液时用吸头接触容器壁时可以获得更好的一致性。将吸头的孔口端沿着容器壁向上滑动可以去除孔口端残留的液体。另外两种技巧同样非常适用于水溶(非粘性)液。
总体来说, 移液器吸液时需要掌握以下要领:
● 垂直吸液。
● 5mL和10mL的移液器,吸头需浸入液面5mm,慢吸液体,达到预定体积后,在液面下停顿3秒,再离开液面。
● 吸液时缓慢松开控制器,否则液体进入吸头过快会导致液体倒吸入移液器内部
● 吸取挥发液体时,需润洗吸头4-6次,让套筒室内的蒸汽饱和,可以避免产生漏液。
4、移液器的正确放置
使用完毕,可以将其竖直挂在移液枪架上,但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时,切勿将移液器水平放置或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。
如不使用,要把移液枪的量程调至最大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。
5、常见的错误操作
(1)装配吸头时,反复撞击吸头,导致吸头难以脱卸,甚至损坏移液器。
(2)吸液时,移液器倾斜,导致移液不准确,同时液体容易进入移液器套柄。
(3)吸液时拇指迅速放开,这样会迫使液体形成湍流状态,液体会直接冲到移液器内部。
(4)直接按到第二档吸液(应该按照上述标准方法操作)。
(5)用大量程的移液器移取小体积样品(应该选择合适量程范围的移液器)。
(6)平放带有残余液体吸头的移液器(应将移液器挂在移液器架上)。
二、微量移液器使用注意事项
(1)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
(2)为获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层“液膜”,造成排液量偏小而产生误差。
(3)浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
(4)可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL蒸馏水20℃时重0.9982g。
(5)移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的,长期操作会使内部零件松散而损坏移液器。
(6)移液器未装吸头时,切莫移液。
(7)在设置量程时,请注意旋转到所需量程,数字清清楚楚在显示窗中。所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程,否则会卡住机械装置,损坏了移液器。
(8)移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如,浓酸、浓碱、有机物等)。
(9)严禁使用移液器吹打混匀液体。
(10)不要用大量程的移液器移取小体积的液体,以免影响准确度。同时,如果需要移取量程范围以外较大量的液体,请使用移液管进行操作。
三、微量移液器快速校准的方法
1.校验机构校准:
使用设备及物品:
电子天平(测量范围200g;分度值0.1mg);烧杯(50mL)1个;烧杯(100mL)1个;定性滤纸若干小块;超纯水80mL。
步骤:
(1)打开电子天平,空载调零;
(2)放入小烧杯待天平显示稳定后,按下归零键归零。给移液器上安装相应的吸液嘴,对移液器的枪头进行预洗;
(3)将移液器的容量调至被检点。被检点一般选择最小,中间和最大容量值。可以是某一指定的容量点;
(4)使用移液器移取被检容量的超纯水至天平的小烧杯内;
(5)待天平显示稳定后,马上读取并记录此时电子天平显示出的数值。记录完毕将电子天平复零;
(6)重复5次执行3-5条。记录完毕,将移液器的容量调至下一被检点继续。被检点遵循从小到大的原则进行调整。
2.使用移液器验证仪SmartCheck进行自行校准
SmartCheck移液器验证仪是一种自动化移液器数据校准的简单仪器,方便快捷,6秒钟即可出数据,适用于个品牌移液器。
四、微量移液器的修正方法
(1)将移液器调整至最小量程,按照校准方法得到当前的实际容量值,根据与标示容量值的差值,通过移液器上的调准旋钮进行调整;
(2)当调整后测得的实际容量值与标示容量值符合要求时,将移液器容量调整至中间量程继续测量。中间量程符合要求时,再调整至最大量程继续测量;
(3)如果中间量程或者最大量程有一个不符合要求时,则需重新调整至最小量程继续修正,直到3个量程的值都符合要求为止;
(4)修正完毕的移液器,需重新进行校准;
(5)最小量程低于10μL的,不进行修正。如果最大量程和中间量程符合校准要求的,继续使用,否则返厂维修。
五、微量移液器的日常维护保养
(1)如长时间不使用,要把移液枪的量程调至最大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧;
(2)定期清洁移液器外壁,可以用95%酒精或60%的异丙醇,再用蒸馏水擦拭,自然晾干;
(3)使用时要检查是否有漏液现象。方法是吸取液体后悬空垂直放置几秒中,看看液面是否下降。如果漏液,则检查吸液嘴是否匹配和弹簧活塞是否正常;
(4)当移液器吸嘴内有液体时,严禁将移液器水平或倒置放置,以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞;
(5)使用正确的方法安装吸头,切记用力不能过猛,更不能采取剁吸头的方法来进行安装。
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