胎牛血清是细胞培养常用的生物试剂,那么用不完的胎牛血清FBS该如何储存呢?
胎牛血清FBS 一般需要冷冻保存,在 -5 到 -20°C 之间,并且可以在 2 到 8°C 的温度下解冻。将血清等分并冷冻在较小的部分(通常为 50 ml 试管)中通常很有用,以避免多次冷冻和解冻循环。有时,一些 FBS 等分试样在冷冻温度下仍保留在液体中。这是由于缺乏用于开始结晶(冷冻)的成核中心(颗粒物质)。如果您只是用手指轻弹管子,它们通常几乎会立即凝固。解冻后有一些沉淀是很常见的。沉淀物,可能是由于某些血清蛋白的变性,可以通过短暂的离心来清除,这通常不会影响血清的质量。
胎牛血清的处理方法主要有以下几种:
1.热灭活
FBS 的常见处理方法是热灭活,其中将 FBS 在 56°C 的水浴中加热 30 分钟,偶尔摇晃。目的是灭活 FBS中存在的补体系统的任何成分,以及其他潜在的未知细胞生长抑制剂。以前热灭活也是为了去除支原体污染,这不再是一个问题,因为现在所有的血清产品都通过小到足以去除支原体的孔径进行过滤。必须注意的是,热灭活也可能产生不良影响,例如降低培养细胞附着在表面上的能力。热灭活过程必须小心进行,因为温度过高或长时间加热会使生长因子失活,并产生沉淀物。
2.活性炭处理
活性炭可以与亲脂性分子结合,因此已用于从 FBS 中去除激素,例如雄激素、雌二醇、孕酮、皮质醇、睾酮、三碘甲状腺原氨酸 (T3) 和甲状腺素 (T4)。这些血清脂质激素倾向于干扰免疫测定系统和胰岛素测定方法。
3.透析
透析可以从 FBS 中去除所有分子量小于 10,000 MW 的分子。这包括极性和非极性分子。去除激素、细胞因子、葡萄糖、氨基酸和许多其他物质。透析还可以去除 FBS 中的抗生素和其他外源性分子。
4.伽马辐照
伽马辐照可以是 FBS 灭菌过程的一部分。FBS 通常通过 0.1 um 过滤器多次过滤,以消除微生物。伽马射线照射可以灭活牛类中常见的病毒。然而,一些病毒种类,例如细小病毒,对伽马射线照射具有抗性。
5.低 IgG
尽管 FBS 的 IgG 含量较低,但对于某些特定应用来说,即使这个水平也可能过高。通过捕获色谱法可以进一步显着降低 IgG 水平。具有低 IgG 的 FBS 用于抗体生产、重组蛋白合成和其他应用。
FBS主要产自于哪里?
胎牛血清的产地主要集中于美、澳大利亚、新西兰、加拿大,以及南美洲和中美洲等地区,血清产品的生产和收集均受指机构管理。FBS通常被标记为 USDA 级或欧洲级。
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