摘要：本文通过实验数据对比，解析不同技术路线的特异性差异，提供引物设计与反应体系优化方案。
在 LAMP 反应中，非特异性扩增发生率高达 28%（《Biosensors & Bioelectronics》2023），主要源于低温退火（55-65℃）引发的引物二聚体。相比之下，常规 PCR 通过以下策略提升特异性：
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Tm 值：58-62℃（相差≤2℃）
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GC 含量：40-60%
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3' 端避免连续 G/C（≤3 个）
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产物长度：100-300bp（利于电泳分离）
实验验证：
某科研团队在检测 EGFR 突变时，通过添加 5% DMSO 并优化引物，使非特异性条带减少 70%，扩增效率提升 2 倍。
