苏州阿尔法生物实验器材有限公司

技术文章
可用于生产重组蛋白的宿主细胞有哪些?
来源: 时间:2022-02-28

      重组蛋白通常通过将重组DNA转染到宿主细胞中来产生,随后培养宿主细胞并转录和翻译转染的DNA。可以选择不同的宿主细胞用于重组蛋白的生产,其选择取决于需要产生的蛋白质的类型、其功能活性和所需的产量。 


重组蛋白

哺乳动物系统

     哺乳动物系统通常用于表达哺乳动物蛋白质,因为它们代表了生理相关的环境。该系统用于生产人类抗体、复合蛋白和其他用于基于细胞的检测的蛋白质。哺乳动物表达系统也可用于细胞系内蛋白质的瞬时或稳定表达。瞬时表达可在一到两周内产生大量蛋白质,而具有稳定表达的细胞系可用于多次实验。瞬时表达系统使用悬浮培养并具有产生克/升产量的能力。此外,与其他系统相比,哺乳动物系统具有更高水平的天然折叠和翻译后修饰。

昆虫表达系统

     昆虫细胞是产生重组蛋白的另一种选择。昆虫细胞具有许多优点,其主要优点是该系统可以按比例放大并适用于功能上与哺乳动物蛋白质相似的蛋白质的大规模表达。此外,昆虫表达系统可以产生高达 500ug/L 的产量。然而,该系统的缺点包括与原核系统相比更具挑战性的过程和培养条件的冗长。

酵母菌和丝状真菌的作用

     酿酒酵母是第一个用于制造重组蛋白的酵母菌。该物种与其他几种酵母物种一起将新产生的重组蛋白分泌到培养基中。与原核系统相比,酵母细胞还可以对哺乳动物蛋白质进行正确的折叠和翻译后修饰。该系统的一个缺点是与哺乳动物细胞相比,酵母细胞中表达的蛋白质的糖基化存在差异。酵母系统可用于产生不需要糖基化的蛋白质。胰岛素是一个值得注意的例子,因此酵母系统已被广泛用于生产这种蛋白质。

 丝状真菌也已被用于产生各种重组蛋白。真菌可分泌高达 30g/L 的蛋白质。然而,真菌也会产生蛋白酶,这限制了它们用于产生重组蛋白的用途。

细菌系统

     细菌可以很容易且相当快速地培养和生长,使该系统受到研究人员的欢迎。细菌细胞也可以产生高水平的重组蛋白。

该系统的主要缺点是非功能性蛋白质的表达,因为细菌不具备实现哺乳动物蛋白质折叠或翻译后修饰的内部机制。在某些情况下,这些蛋白质也可能变得不溶,因此需要使用苛刻的变性剂和蛋白质重折叠程序来回收重组蛋白质。

无细胞表达系统

      在无细胞系统中,可以使用与翻译相容的全细胞提取物在体外 进行蛋白质的合成。这些细胞提取物包含转录、翻译和翻译后修饰重组蛋白所需的所有分子和酶。通过额外补充辅因子,可在数小时内形成感兴趣的蛋白质。然而,该系统可能不适用于重组蛋白的大规模生产。该系统的优点包括无需细胞培养即可合成蛋白质;此外,还可以同时表达多种蛋白质。

化学蛋白质合成

      该方法用于合成具有非天然氨基酸或具有毒性的蛋白质的重组蛋白质。虽然这种方法提供了一种产生纯蛋白质的方法,但产品的数量是有限的。此外,对于较长的多肽链,该方法可能很昂贵。

      苏州阿尔法生物实验器材有限公司十三年专注于生物反应器,生物反应器、发酵罐、PCR仪、凝胶成像、移液器等实验室仪器设备,生物反应器采用进口零部件,三重防污染密封设计工艺,有2L/5L/15L/75L/150L/200L等多种规格可以供选择,可用于生产 重组蛋等创新药开发、生产。另外支持特殊定制已适应不同类型的客户,具有价廉质优、售后有保障基本实现了进口生物反应的国产化替代。咨询电话0512-62956104.

 苏州阿尔法生物实验器材有限公司自2008年成立,扎根苏州生物医药产业园,专注为各类科研机构,制药企业提供实验室仪器、科研试剂、实验耗材全品类一站式供应解决方案,覆盖分子生物学、细胞培养、微生物检测、药物研发、临床体外诊断、理化分析六大主流实验场景,一站式配齐实验室全部所需物资。

  公司持有梅特勒托利多、海尔生物、朗基、知楚、天能、恒尔、天根生化、耐思等国内外一线仪器试剂品牌正规授权,全线产品具备完整质检报告、注册资质,满足高校实验室、药企研发部、第三方检测机构、医院检验科CNAS、GMP合规使用要求。

   仪器品类涵盖PCR仪、超净工作台、摇床、低温冰箱、细胞培养箱、电泳仪,凝胶成像仪、离心机、移液器、分光光度计等全套实验室设备;试剂包含细胞培养基、胎牛血清、生化试剂盒、标准品、缓冲液;耗材覆盖离心管、培养皿、枪头、过滤膜、冻存管等一次性塑料制品,上万种常备库存。

    苏州自有大型恒温仓储中心,绝大多数仪器耗材现货当日出库,江浙沪地区快速配送。配备专业实验技术顾问,可根据不同实验场景提供精准产品选型搭配,同时提供仪器安装调试、故障检修、耗材批量定制、小样申领配套服务,不用客户分开对接多家供应商,采购流程高效省心。

    高校课题组、生物医药企业、检测实验室批量采购、仪器耗材配套询价,均可拨打全国服务热线0512-62956104,或者18934597460 /18020269905欢迎前往苏州工业园区星湖街218号生物纳米园A5楼301室实地看样洽谈。