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CHO细胞培养抗体表达工艺
来源: CHO细胞培养抗体表达工艺 时间:2024-06-17

     在生物医药领域,抗体作为一种重要的治疗性药物,其研发和生产技术一直备受关注。CHO细胞因具有较大优势,成为生产抗体的重要平台。本文将介绍CHO细胞培养抗体表达工艺,探抗体生产关键技术及注意事项。

CHO细胞培养流程

一、CHO细胞培养抗体表达简介

CHO细胞培养抗体表达工艺是指利用CHO细胞作为表达系统,在特定条件下培养,使细胞内抗体基因得以表达并分泌到培养基中。这一工艺主要包括细胞培养、诱导表达、收获和纯化等步骤。

二、抗体表达关键技术

1. 细胞培养

(1)选择合适的培养基:CHO细胞培养初期采用含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基,保证细胞生长所需营养。后期则选用无血清培养基(SFM),以避免血清污染和提高产品纯度。

(2)培养条件:在37℃、5% CO2的条件下,确保细胞生长环境的稳定。

2. 诱导表达

(1)选择合适的诱导剂:根据抗体基因的特性,选择合适的诱导剂,如异丙乙酸、氯化钴等,以提高抗体表达水平。

(2)诱导时机:在细胞生长至对数生长期时进行诱导,有利于抗体的高效表达。

3. 收获和纯化

(1)细胞收获:根据细胞生长曲线,选择合适的收获时机,以提高抗体产量。

(2)纯化:采用高效液相色谱、离子交换层析等方法对收获的抗体进行纯化,去除杂质,提高产品纯度。

三、CHO细胞培养抗体表达过程注意事项

1. 细胞株的筛选与优化:选择稳定、高产的CHO细胞株,通过基因工程等手段优化抗体基因,提高抗体表达水平。

2. 培养条件的优化:根据抗体基因的特性和细胞生长曲线,调整培养条件,如温度、pH、氧气浓度等,以提高抗体产量。

3. 诱导剂的选择与优化:通过实验筛选合适的诱导剂及浓度,以实现抗体的高效表达。

4. 避免污染:在培养过程中,严格控制无菌操作,防止外源性污染。同时,定期检测培养基和设备,确保无菌状态。

5. 监测细胞生长与代谢:通过细胞计数、生物传感器等技术,实时监测细胞生长情况,及时调整培养条件,保证抗体生产的稳定性。

6. 优化纯化工艺:根据抗体特性,选择合适的纯化方法,提高产品纯度,降低生产成本。

细胞培养系统

    CHO细胞培养抗体表达工艺是一种高效生产抗体的关键技术。通过优化细胞培养、诱导表达、收获和纯化等环节,可以实现抗体的高产、高纯度生产。在实际操作过程中,需注意细胞株筛选、培养条件优化、诱导剂选择、污染控制、细胞生长与代谢监测及纯化工艺优化等方面,以提高抗体生产的效率和产品质量。

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