3D细胞培养是一种在体外模拟体内环境的实验技术,它允许细胞在三维空间中生长和相互作用,从而更接近于其在体内的自然状态。这种技术对于研究细胞行为、组织发育、疾病机制以及药物筛选等方面具有重要意义。在进行3D细胞培养时,需要使用一系列专门的耗材和设备。
一、 培养容器类
- 3D细胞培养板:如NEST系列的 96孔板和384孔板,其独特的聚合物涂层可支持癌症和干细胞研究等,能促进球状体和类器官的快速形成,且具有高可重复性、稳定性等优点,孔底为圆形,透明度高,材质一般为聚苯乙烯,使用方便,数据可靠.
- 培养皿:不同规格的培养皿常用于细胞的常规培养和一些特殊培养需求,如60mm、100mm等常见规格,材质有塑料和玻璃两种,玻璃培养皿可重复使用,但需清洗和灭菌,塑料培养皿则为一次性使用,更加方便.
- 细胞培养瓶:有多种规格,如25cm²、75cm²、175cm²等,适用于不同数量细胞的培养,其瓶盖有密封盖和透气盖之分,透气盖可保证细胞培养过程中气体交换.
二、 基质材料类
- 微载体:常见的有片状微载体等,为细胞提供附着生长的基质,可增大细胞培养的表面积,提高细胞密度,促进细胞间的相互作用,模拟体内的三维生长环境,有利于细胞的生长、分化和功能表达 。
- 支架材料:包括天然高分子材料如胶原蛋白、壳聚糖等,以及合成高分子材料如聚乳酸、聚己内酯等,这些材料可制成三维多孔结构的支架,细胞能够在支架内部生长和增殖,形成类似组织的结构。
三、 细胞处理试剂类
- 胰蛋白酶:用于细胞的消化和传代,使细胞从培养容器表面脱离形成单细胞悬液,但使用时需注意浓度、温度和消化时间,以免对细胞造成损伤.
- 细胞解离液:非酶性的细胞解离液可在不损伤细胞表面蛋白的情况下使细胞分离,适用于一些对胰蛋白酶敏感的细胞类型.
- 胎牛血清:含有丰富的营养物质、生长因子和激素等,能为细胞提供全面的营养支持,促进细胞生长和增殖,但需注意血清的质量和批次间的差异.
- 抗生素:如青霉素、链霉素等,用于预防和控制细胞培养过程中的细菌污染,一般在细胞培养初期或细胞较为脆弱时添加.
- 抗真菌药物:如两性霉素B等,可防止细胞培养中真菌的污染,尤其是在使用血清等易受真菌污染的试剂时需添加.
-培养基和培养液是3D细胞培养的基础,它们提供了细胞生长所需的营养和环境。常用的培养基包括DMEM、RPMI 1640、MEM等,通常还会添加胎牛血清、人血清、抗生素和生长因子等成分以优化培养条件。
四、 检测试剂类
- 细胞增殖试剂:如MTT试剂、CCK-8试剂等,可通过检测细胞的代谢活性来反映细胞的增殖能力,操作简便,适用于大规模的细胞增殖检测.
- 细胞凋亡检测试剂盒:包括Annexin V-FITC/PI双染试剂盒等,可用于检测细胞凋亡的程度和比例,对于研究细胞的生长调控和药物作用机制具有重要意义.
- 实时细胞分析仪配套试剂:若使用实时细胞分析仪来监测细胞的增殖、迁移和侵袭等动态过程,则需要相应的试剂,如特定的荧光染料或标记物等.
五、 其他常用耗材
- 移液器和吸头:不同规格的移液器(如1ml、5ml、10ml等)和与之匹配的吸头是细胞培养中必不可少的工具,用于精确地吸取和分配培养基、细胞悬液等液体.
- 离心管:15ml和50ml的离心管常用于细胞的离心收集和分离,其材质一般为塑料,具有良好的耐腐蚀性和密封性.
- 细胞冻存管:用于保存冻存细胞,一般为塑料材质,有不同规格可供选择,冻存管需耐受低温且密封性好,以保证细胞在液氮中长时间保存的活性.
- 无菌手套、口罩、帽子等:在细胞培养操作过程中,需佩戴无菌手套、口罩和帽子等,以防止操作人员对细胞培养环境和细胞造成污染.
- 培养箱:细胞培养需要在特定的温度、湿度和气体环境下进行,常见的有二氧化碳培养箱,可精确控制二氧化碳浓度、温度和湿度,为细胞生长提供稳定的环境.
- 显微镜:倒置显微镜是细胞培养中常用的观察工具,可用于观察细胞的形态、生长状态和细胞密度等,帮助判断细胞培养的情况.
- 细胞计数仪:用于准确地计数细胞数量,确定细胞接种密度和细胞生长曲线等,提高实验的准确性和可重复性.
苏州阿尔法生物提供3D细胞培养耗材、实验耗材、实验试剂、实验室设备等,在进行3D细胞培养时,需根据具体的细胞类型、培养目的和实验要求,合理选择和使用上述试剂耗材,以确保细胞培养的成功和实验结果的可靠性 。