
蛋白纯化是重组蛋白表达、抗体制备、结构生物学及功能研究的核心环节。层析填料(Chromatography Resin)作为蛋白纯化的关键耗材,其选择直接决定了纯化效率、蛋白活性回收率及最终纯度。苏州阿尔法生物作为苏州工业园区专业生命科学试剂供应商,提供涵盖亲和层析、离子交换层析、分子筛(凝胶过滤)层析、疏水层析、金属螯合层析等主流技术路线的全系列层析填料及配套纯化试剂,覆盖从捕获(Capture)到精细纯化(Polishing)的完整工作流程。
| 产品类型 | 代表型号/品牌 | 纯化原理 | 目标蛋白/应用场景 | 关键参数 |
|---|---|---|---|---|
| Ni-NTA亲和层析填料 | Cytiva Ni-NTA、QIAGEN Ni-NTA、纳微 Ni-6FF | 固定化金属螯合亲和层析(IMAC) | His标签(6×His)重组蛋白捕获纯化 | 载量≥20mg His蛋白/mL凝胶;适用pH 2-14 |
| Ni-IDA亲和层析填料 | Bio-Rad Bio-Scale Mini Ni-IDA | 亚氨基二乙酸螯合镍离子 | His标签蛋白纯化,比Ni-NTA洗脱更温和,杂质蛋白更少 | 载量10-15mg/mL;非特异性吸附更低 |
| GST标签纯化填料 | Cytiva GSTrap FF、Bio-Rad Bio-Globin GST | 谷胱甘肽(GSH)亲和层析 | GST融合标签蛋白一步纯化 | 载量≥10mg GST蛋白/mL;结合缓冲含还原型谷胱甘肽 |
| Strep-tag/MBP/Flag标签纯化填料 | IBA Strep-Tactin、NEB MBP纯化树脂 | 特异性配体-标签亲和结合 | Strep-tag II、MBP、Flag等标签融合蛋白高特异性纯化 | 洗脱条件温和,保留蛋白天然活性 |
| Protein A亲和层析填料 | Cytiva MabSelect SuRe、Repligen rProtein A | Protein A与IgG Fc段特异性结合 | 单克隆抗体、抗体片段(scFv/Fab)纯化 | 载量≥30mg IgG/mL;耐碱清洗(0.5M NaOH) |
| Protein G/L亲和层析填料 | Thermo Fisher ProSep vA Ultra、Cytiva Protein G HP | Protein G/L与IgG结合,对亚类覆盖更广 | 小鼠/兔/人源多克隆及单克隆抗体制备纯化 | Protein G对小鼠IgG1亲和力更强;Protein L仅结合轻链 |
| 阳离子交换层析填料(CM/SP) | Cytiva SP Sepharose FF、Bio-Rad Nuvia cS | 带负电基团结合带正电蛋白 | 蛋白精细纯化、去除内毒素及核酸杂质 | CM为弱阳离子(pH 4-7);SP为强阳离子(pH 4-10) |
| 阴离子交换层析填料(DEAE/Q) | Cytiva DEAE Sepharose FF、Q Sepharose HP | 带正电基团结合带负电蛋白 | 蛋白精细纯化、核酸去除、抗体阴离子交换步骤 | DEAE为弱阴离子(pH 6-9);Q为强阴离子(pH 2-12) |
| 分子筛/凝胶过滤层析填料 | Cytiva Superdex 75/200 Increase、Sephadex G-25 | 按分子量大小分离 | 蛋白脱盐、缓冲液置换、寡聚体/聚集体分析、分子量测定 | Superdex 75适用于10-70kDa;200适用于10-600kDa蛋白 |
| 疏水层析填料(HIC) | Cytiva Butyl Sepharose 4 FF、Phenyl Sepharose HP | 高盐条件下结合蛋白疏水区域 | 抗体聚集体去除、蛋白精细纯化(常作为第三步Polishing) | 丁基疏水性较弱适合敏感蛋白;苯基疏水性更强 |
| 脱盐柱/脱盐试剂盒 | Zeba Spin脱盐柱(Thermo)、HiTrap Desalting(Cytiva) | 凝胶过滤快速脱盐 | 小体积样品(0.5-5mL)快速脱盐换液,去除游离标记染料 | 5分钟内完成脱盐;盐去除率≥95% |
| Protein A/G磁珠 | Thermo Dynabeads Protein A/G、Cytiva Monarch Protein A | 磁性微球表面偶联Protein A/G | 小体积样本抗体快速免疫沉淀、Co-IP实验、抗体筛选 | 磁珠粒径2-4μm;结合量≥10μg IgG/mg磁珠 |
| 免疫沉淀(IP)填料 | Protein A/G琼脂糖、FLAG M2亲和凝胶 | 抗体-抗原特异性识别 | 蛋白-蛋白相互作用研究(Co-IP)、ChIP实验、蛋白功能验证 | 低非特异性吸附;适用于天然或变性条件 |
| 标签蛋白纯化试剂盒 | His-tag纯化试剂盒、GST纯化试剂盒(全式金/天根/碧云天) | 预装柱+缓冲液套装 | 实验室小规模His/GST标签蛋白快速纯化,新手友好 | 含预装Ni-NTA/GSH柱+结合/洗涤/洗脱缓冲液 |
| BCA蛋白定量试剂盒 | 碧云天BCA试剂盒、Thermo Pierce BCA、诺唯赞BCA | BCA法(二喹啉甲酸法)比色定量 | 纯化后蛋白浓度快速准确定量,兼容去垢剂和还原剂 | 线性范围20-2000μg/mL;96孔板法最小样本量1μL |
| Bradford蛋白定量试剂盒 | 碧云天Bradford试剂盒、Bio-Rad蛋白定量试剂盒 | 考马斯亮蓝G-250染料结合法 | 蛋白浓度快速定量,操作简便、速度快(5分钟出结果) | 线性范围1-1500μg/mL;不耐碱性缓冲液和去垢剂 |