苏州阿尔法生物实验器材有限公司

蛋白组学试剂

蛋白纯化层析填料与蛋白纯化试剂——从粗提到高纯度的一站式解决方案

蛋白纯化是重组蛋白表达、抗体制备、结构生物学及功能研究的核心环节。层析填料(Chromatography Resin)作为蛋白纯化的关键耗材,其选择直接决定了纯化效率、蛋白活性回收率及最终纯度。苏州阿尔法生物作为苏州工业园区专业生命科学试剂供应商,提供涵盖亲和层析、离子交换层析、分子筛(凝胶过滤)层析、疏水层析、金属螯合层析等主流技术路线的全系列层析填料及配套纯化试剂,覆盖从捕获(Capture)到精细纯化(Polishing)的完整工作流程。

为什么选择我们的蛋白纯化产品?

  • 全技术路线覆盖:从Ni-NTA亲和捕获到分子筛精细纯化,一站式配齐所有层析步骤所需填料
  • 多品牌可选:提供Cytiva(GE Healthcare)、Thermo Fisher、Bio-Rad、默克、纳微科技、博格隆等国内外主流品牌,满足不同预算和实验精度需求
  • 高载量与高回收率:Ni-NTA填料His标签蛋白载量≥20mg/mL凝胶,抗体纯化Protein A/G填料载量≥30mg IgG/mL,确保高产量
  • 良好的批间一致性:严格质控确保每批次填料性能稳定,满足工艺放大及重复性要求
  • 苏州本地现货供应:常规填料苏州仓库现货,今天下单明天到,支持小包装试用

蛋白纯化层析填料与试剂全品类一览

产品类型 代表型号/品牌 纯化原理 目标蛋白/应用场景 关键参数
Ni-NTA亲和层析填料 Cytiva Ni-NTA、QIAGEN Ni-NTA、纳微 Ni-6FF 固定化金属螯合亲和层析(IMAC) His标签(6×His)重组蛋白捕获纯化 载量≥20mg His蛋白/mL凝胶;适用pH 2-14
Ni-IDA亲和层析填料 Bio-Rad Bio-Scale Mini Ni-IDA 亚氨基二乙酸螯合镍离子 His标签蛋白纯化,比Ni-NTA洗脱更温和,杂质蛋白更少 载量10-15mg/mL;非特异性吸附更低
GST标签纯化填料 Cytiva GSTrap FF、Bio-Rad Bio-Globin GST 谷胱甘肽(GSH)亲和层析 GST融合标签蛋白一步纯化 载量≥10mg GST蛋白/mL;结合缓冲含还原型谷胱甘肽
Strep-tag/MBP/Flag标签纯化填料 IBA Strep-Tactin、NEB MBP纯化树脂 特异性配体-标签亲和结合 Strep-tag II、MBP、Flag等标签融合蛋白高特异性纯化 洗脱条件温和,保留蛋白天然活性
Protein A亲和层析填料 Cytiva MabSelect SuRe、Repligen rProtein A Protein A与IgG Fc段特异性结合 单克隆抗体、抗体片段(scFv/Fab)纯化 载量≥30mg IgG/mL;耐碱清洗(0.5M NaOH)
Protein G/L亲和层析填料 Thermo Fisher ProSep vA Ultra、Cytiva Protein G HP Protein G/L与IgG结合,对亚类覆盖更广 小鼠/兔/人源多克隆及单克隆抗体制备纯化 Protein G对小鼠IgG1亲和力更强;Protein L仅结合轻链
阳离子交换层析填料(CM/SP) Cytiva SP Sepharose FF、Bio-Rad Nuvia cS 带负电基团结合带正电蛋白 蛋白精细纯化、去除内毒素及核酸杂质 CM为弱阳离子(pH 4-7);SP为强阳离子(pH 4-10)
阴离子交换层析填料(DEAE/Q) Cytiva DEAE Sepharose FF、Q Sepharose HP 带正电基团结合带负电蛋白 蛋白精细纯化、核酸去除、抗体阴离子交换步骤 DEAE为弱阴离子(pH 6-9);Q为强阴离子(pH 2-12)
分子筛/凝胶过滤层析填料 Cytiva Superdex 75/200 Increase、Sephadex G-25 按分子量大小分离 蛋白脱盐、缓冲液置换、寡聚体/聚集体分析、分子量测定 Superdex 75适用于10-70kDa;200适用于10-600kDa蛋白
疏水层析填料(HIC) Cytiva Butyl Sepharose 4 FF、Phenyl Sepharose HP 高盐条件下结合蛋白疏水区域 抗体聚集体去除、蛋白精细纯化(常作为第三步Polishing) 丁基疏水性较弱适合敏感蛋白;苯基疏水性更强
脱盐柱/脱盐试剂盒 Zeba Spin脱盐柱(Thermo)、HiTrap Desalting(Cytiva) 凝胶过滤快速脱盐 小体积样品(0.5-5mL)快速脱盐换液,去除游离标记染料 5分钟内完成脱盐;盐去除率≥95%
Protein A/G磁珠 Thermo Dynabeads Protein A/G、Cytiva Monarch Protein A 磁性微球表面偶联Protein A/G 小体积样本抗体快速免疫沉淀、Co-IP实验、抗体筛选 磁珠粒径2-4μm;结合量≥10μg IgG/mg磁珠
免疫沉淀(IP)填料 Protein A/G琼脂糖、FLAG M2亲和凝胶 抗体-抗原特异性识别 蛋白-蛋白相互作用研究(Co-IP)、ChIP实验、蛋白功能验证 低非特异性吸附;适用于天然或变性条件
标签蛋白纯化试剂盒 His-tag纯化试剂盒、GST纯化试剂盒(全式金/天根/碧云天) 预装柱+缓冲液套装 实验室小规模His/GST标签蛋白快速纯化,新手友好 含预装Ni-NTA/GSH柱+结合/洗涤/洗脱缓冲液
BCA蛋白定量试剂盒 碧云天BCA试剂盒、Thermo Pierce BCA、诺唯赞BCA BCA法(二喹啉甲酸法)比色定量 纯化后蛋白浓度快速准确定量,兼容去垢剂和还原剂 线性范围20-2000μg/mL;96孔板法最小样本量1μL
Bradford蛋白定量试剂盒 碧云天Bradford试剂盒、Bio-Rad蛋白定量试剂盒 考马斯亮蓝G-250染料结合法 蛋白浓度快速定量,操作简便、速度快(5分钟出结果) 线性范围1-1500μg/mL;不耐碱性缓冲液和去垢剂


典型应用场景

  • 重组蛋白表达纯化:Ni-NTA/GST标签纯化填料一步捕获 → 离子交换层析精细纯化 → 分子筛脱盐/聚集体去除,获得高纯度活性蛋白用于酶学、结构生物学(X射线晶体学/Cryo-EM)研究
  • 单克隆抗体制备:Protein A/G亲和层析捕获 → 低pH病毒灭活 → 离子交换/疏水层析去除聚集体和杂质 → 病毒过滤及超滤浓缩,符合生物制药GMP级纯化工艺要求
  • 蛋白-蛋白相互作用研究:Protein A/G磁珠或免疫沉淀填料偶联特异性抗体 → Co-IP捕获互作蛋白复合体 → Western Blot或质谱鉴定互作蛋白
  • 多克隆抗体制备与纯化:血清/腹水经Protein A/G填料纯化 → 获得高纯度IgG抗体 → 用于Western Blot、ELISA、免疫组化等下游实验
  • 蛋白定量与质控:BCA/Bradford蛋白定量试剂盒对纯化各阶段蛋白浓度进行准确定量,评估纯化回收率和纯度

如何选择适合的蛋白纯化填料?

  • 按标签类型选捕获填料:His标签首选Ni-NTA(高载量)或Ni-IDA(高特异性);GST标签选GSTrap/GSH填料;无标签蛋白需先构建标签或使用非标签纯化策略
  • 按蛋白性质选精细纯化填料:等电点偏碱性选阳离子交换(CM/SP),偏酸性选阴离子交换(DEAE/Q);聚集体问题选分子筛或疏水层析
  • 按样本规模选规格:小量筛选( <1mg蛋白)选预装柱/试剂盒;中试放大(10-100mg)选1mL预装柱或散装填料自制柱;工艺生产(g级)选工业级散装填料
  • 按下游要求选纯度等级:基础研究选标准级填料;生物制药/临床前研究选GMP级或高纯度级填料(如MabSelect SuRe)

2026年蛋白纯化技术趋势

  • 多模式层析填料(Mixed-Mode)崛起:如Cytiva Capto adhere、Bio-Rad Nuvia cS等将离子交换+疏水作用结合于一体,减少纯化步骤、提高回收率,成为抗体纯化新工艺主流
  • 连续层析与自动化纯化平台:AKTA pure系列及国产自动化纯化系统支持连续流层析(MCC/SMB),大幅提升填料利用率并降低缓冲液消耗,适合工艺放大与GMP生产
  • 一次性层析柱与预装柱普及:一次性使用预装柱避免交叉污染和清洗验证成本,在生物制药CMC工艺开发中快速普及
  • 国产填料加速替代进口:纳微科技、博格隆、利穗科技等国产层析填料性能已达国际水平,价格优势明显,在抗体药物及重组蛋白生产中加速替代Cytiva/Bio-Rad进口产品
碧云天PBS浓缩型-ST476

碧云天PBS浓缩型-ST476

碧云天PBS浓缩型-ST476用水稀释至PBS(1X)后,pH值为7.3±0.1。PBS(10X)缓冲溶液经过除菌处理,用无菌水稀释至1X后,可以直接用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途。
碧云天蛋白酶抑制剂P1006

碧云天蛋白酶抑制剂P1006

碧云天蛋白酶抑制剂P1006是一种通用型用于细胞或组织蛋白提取等的蛋白酶抑制剂混合物(200mMAEBSF,30μMAprotinin,13mMBestatin,1.4mME64and1mMLeupeptininDMSO),并提供独立包装的0.1MEDTA。
上海天能-预染蛋白marker

上海天能-预染蛋白marker

上海天能-预染蛋白marker货号包装180-6006500µL产品描述Biote™彩色预染蛋白marker为宽范围蛋白分子量标准,范围为10kDa到250kDa,包含11种预染高纯度重组蛋白质,在Tri-甘氨酸凝胶体系中,10kDa条带为绿色,70kDa条带为红色,其余条带均为蓝色.
上海天能Tanon快速转膜缓冲液(10X)

上海天能Tanon快速转膜缓冲液(10X)

上海天能Tanon快速转膜缓冲液(10X)性能特点范围广:可与其它实验室转膜设备配套使用时间短:将整个湿转过程控制在15-40min左右产热少:与普通转膜液平行对比,产热减少50%效果好:只需要不到40分钟,4kD-500kD蛋白即可高-效转印
碧云天P0068-彩色预染蛋白质分子量标准(10-180kD)

碧云天P0068-彩色预染蛋白质分子量标准(10-180kD)

黄叶地碧云天P0068彩色预染蛋白质分子量标准(PrestainedColorProteinMarker)包含了从10kD到180kD共10种纯化的预染蛋白质,其中72kD条带为红色,10kD条带为绿色,其余条带为蓝色(见右图),适合作为SDS-PAGE或Western的蛋白质分子量标准。适合在Western时使用,这样在转膜后可以直接清楚地观察到转膜效果。
天根试剂-双色预染蛋白质Marker-MP205

天根试剂-双色预染蛋白质Marker-MP205

天根试剂-双色预染蛋白质Marker-MP205为几种蛋白质分别纯化预染后混合而成的蛋白质溶液,这些蛋白混合物与蓝色或彩色染料共价偶联,可在凝胶电泳时出现强度均匀的蛋白带,可以直接观察蛋白电泳及判断Western转移效果。同未预染的蛋白标准相比,预染蛋白Marker因与染料共价偶联而在SDS-PAGE电泳时的迁移特性发生某些改变。
Tanon电泳Precast Gel天能SDS预制胶-Western blot

Tanon电泳Precast Gel天能SDS预制胶-Western blot

Tanon电泳PrecastGel天能SDS预制胶-Westernblot为连续梯度聚丙烯酰胺变性电泳凝胶,用于蛋白质样品的分离(分离范围4-400kDa)。本产品采用新型缓冲液配方,使蛋白电泳条带更清晰锐利,使得条带更加均匀。缓冲液给蛋白电泳提供稳定的中性pH缓冲环境,能有效地避免聚丙烯酰胺的水解,提高凝胶稳定性。具有较好的稳定性。
碧云天快速银染试剂盒SDS-PAGE蛋白染色p0017s

碧云天快速银染试剂盒SDS-PAGE蛋白染色p0017s

碧云天快速银染试剂盒SDS-PAGE蛋白染色p0017s是一种快速简单、可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白银染的试剂盒。
天根试剂-蛋白预染marker

天根试剂-蛋白预染marker

蛋白预染marker-天根试剂包含12种预染的蛋白质分子量标准,分子量范围为11~245kDa,其中75kDa蛋白条带为红色,25kDa蛋白条带为绿色,其它蛋白条带为蓝色。可通过此预染蛋白Marker直接观察蛋白电泳及清晰地判断WesternBlot的转移效果。
快速染色液-蛋白胶染色液​-QuickBlue

快速染色液-蛋白胶染色液​-QuickBlue

QuickBlue快速染胶液是绿色环保型凝胶染液,可对凝胶中的蛋白条带进行染色,可替代常规的考马斯亮蓝染液。1.无需凝胶固定和脱色,省时,简单;2.不含有甲醇、乙酸等对身体有害,刺鼻的物质;3.无需在通风橱中操作;4.可以完全代替常规的考马斯亮蓝染液。
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