苏州阿尔法生物实验器材有限公司

常见问答
Vero细胞的微载体生物反应器接种培养实验方法
来源: 苏州阿尔法 时间:2021-09-10

标签:生物反应器细胞培养,微载体,接种,实验方法 

Vero细胞近年来作为新时代制药产业的热门细胞,成为转基因、蛋白、抗体类制药企业普遍使用使用的载体工具。使用细胞生物反应器进行Vero细胞的规模化增殖的接种工艺如下:

一、实验前准备

细胞∶Vero 细胞ATCC级别的 )、DMEM培养基(Hyclone)、新生牛血清、抗生素、除菌滤膜、CT-3微载体、2L实验室生物反应器,5L搏旅细胞培养生物反应器、摇瓶、细胞培养瓶、水浴锅。

疫苗生产

二、接种实验方法

1.微载体的预处理和灭菌 接种实验前的微载体需要用无钙、镁离子的PBS磷酸盐缓冲液进行吸胀、洗涤,之后进行高压灭菌处理,工艺控制参数为:吸胀质量浓度不超过50 g·L-1灭菌温度121 20 min

2.转瓶接种操作:

将培养瓶内的 Vero 细胞接种于500ML的转瓶内,CT-3 微载体浓度为 3g/L,并加入适量的混合牛血清的DMEM培养基,此时接种密度以2.0×10°cells/mL为宜。

微载体细胞生长过程中可适当补加微载体 2g/L使微载体浓度达到 5g/L即可接种在5L细胞培养生物反应器中作为种子细胞进行培养

3.规模扩培接种操作

4当细胞生长到达指定密度时,将细胞新的微载体一起转入大容积的微载体培养养反应器中,进行细胞培养。此过程的工艺参数为:控: 370.1℃,溶解氧为 50%空气饱和度,搅拌器的转速维持在2032 r/min即可当细胞密度达 1.1×10'cells/mL时,即可进入下游环节进行产品生产。

细胞培养

  介于国外生物反应器成本高昂,售后服务不便,型号固定、货期长等因素,我国自主研发设备生产的生物反应器目前已广泛应用于制药生产、新药开发、蛋白研发、转基因产品等环节,一些国内生物反应器专业生产商甚至可根据客户要求的尺寸进行定制化操作,比如搏旅除生产固定型号规格外,还可以根据客户要求定制不同级别、规格的生物反应器发酵罐主要用于微生物培养、种子制备、浮细胞培养、贴壁细胞培养、微载体培养等,实现了厂商直供,一罐多用,满足不同的用户需求。苏州阿尔法生物13年专注于生物实验室仪器设备与实验室试剂耗材的专业供应,实验室仪器中所供应的生物反应器可用于灌流培养、固定床式培养、搅拌通气式培养、悬浮培养、贴壁培养等多种细胞培养工艺。在细胞培养、微载体培养、微生物培养、生物制药等领域被广泛应用,同时我们还提供细胞培养基、血清、培养添加剂、细胞培养瓶、培养皿、摇瓶等细胞培养类的试剂耗材 。同时还提供提供免费的实验室设备安装服务、免费技术支持、免费操作指导等服务。如需了解更多,请0512-62956104  18934597460进行咨询。