分界线不是习惯、也不是"哪个更保险"，而是你的培养体系依不依赖CO₂平衡。用碳酸氢盐缓冲体系、放在5%CO₂培养箱里养的哺乳动物细胞，必须用透气盖——培养基pH靠CO₂扩散进瓶内维持，盖死之后CO₂进不去，pH会一路往上漂。反过来，无CO₂环境培养、运输寄送、暂存、厌氧或低溶氧需求，以及用HEPES等非碳酸氢盐缓冲体系的，用密封盖。

CO2摇床CO₂培养箱这两类设备对环境超级敏感！把实验室仪器旁边的窗户、通风口都关掉，避免穿堂风打乱腔体内部的稳定环境。