细胞传代培养步骤，注意事项：一些细胞系可能需要几天时间才能从冷冻保存中完全恢复。比如：一些杂瘤细胞在培养的第一天活力很差，会产生细胞碎片。解冻后，细胞将开始恢复并进入指数增长。

   我们知道开始培养的细胞不能无限期地生长，因为受限区域内的细胞数量不断增加，营养物质也会被消耗，从而 导致有毒的代谢产物增加，另外根据实验或生产需要，也要对细胞进行 扩大培养。通过去除培养基并将细胞转移到新鲜的生长培养基和基质中，细胞获得了新鲜的营养并去除了有毒代谢物，从而可以长期维持培养。

   传代培养是细胞培养常规保种方法之一，也是几乎所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释，分种成多瓶，细胞才能继续生长。这一过程就叫传代。传代培养可获得大量细胞供实验所需。传代要在严格的无菌条件下进行，每一步都需要认真仔细的无菌操作。本实验以传代大鼠骨髓充间质干细胞为例进行细胞传代的步骤做一介绍。