CHO细胞（ChineseHamsterOvarycells）是一种常用于重组蛋白生产的哺乳动物细胞系，而采用生物反应器补料分批培养技术（Fed-Batch）则是一种重要的工艺方法，用于优化CHO细胞中重组蛋白的生产。本文将介绍CHO细胞的优势、补料分批培养的特点和影响因素，以及不同营养物质对细胞生长和目的蛋白表达的影响。

  近 80% 的CAR-T抗体由中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞产生。为了实现更好的细胞生长和高产重组蛋白，补料分批培养通常用于在 CHO 细胞中生产重组蛋白。根据营养物质消耗的需要，在细胞培养中加入含有多种成分的补料培养基，可以影响细胞生长特性，提高重组蛋白的产量和质量。补料分批优化应与 细胞培养环境参数、培养基 组成、补料策略等综合因素相 关联。

  乳酸是CHO细胞补料分批培养的主要副产品之一。在pH控制的生物反应器中，由于添加碱以控制细胞培养基的pH值，高水平乳酸的积累伴随着高渗透压，可能导致制造细胞生长缓慢，甚至大量凋亡，同时产生抗体蛋白的产量也降低不少。

培养参数会影响 CHO 细胞生长、重组蛋白表达、蛋白糖基化、细胞代谢物和其他因素。生物反应器设计用于在 CHO 细胞中培养用于 RTP 生产的悬浮培养物。细胞通过CO2振荡摇床、摇瓶、滚瓶扩增后，接种在生物反应器中进行传代生长。对于补料分批培养，生物反应器中的培养环境参数通常通过实验设计 (DoE) 或一次单因素 (OFAT) 研究进行优化，这些优化包括温度、溶解氧 (DO)、渗透压和 pH值等。

CHO细胞是一种广泛用于生物制药蛋白质生产的宿主。CHO细胞中分离外泌体主要采用聚合物的沉淀(PBP)技术从分批培养中分离和富集细胞外泌体囊泡。分离后的外泌体可以通过多种方法来检测和表征分离的囊泡，这些分析包括动态光散射(DLS)和Zeta电位测量、电子显微镜(EM)和外泌体标记物分析、RNA和脂质分析等。