天根试剂盒FP209-Talent荧光定量检测试剂 -荧光定量pcr试剂盒

产品简介：
     天根试剂盒FP209-Talent荧光定量检测试剂 -荧光定量pcr试剂盒 采用SYBR Green I嵌合荧光法进行Real-Time PCR的专用试剂，可对目标DNA进行快速、特异性的定量检测。优化的预混液可缩短Real-Time PCR的反应时间，适用于标准或快速PCR仪。
     2 × Talent qPCR PreMix采用了抗体修饰的Anti Taq DNA聚合酶，配合优化的qPCR Buffer体系可确保本产品在所有的Real-Time PCR仪上进行高灵敏的快速qPCR反应，qPCR反应时间可缩短50%。此外，Buffer中添加了的H-Competitor因子和EP组分，还使得本产品具有广泛的样本普适性，对具有复杂高级结构的模板、PCR抑制剂残留较多的模板以及长片段扩增等具有非常好的适用性。同时本产品还具有高扩增效率，高扩增特异性和宽广的可信范围等特点，在不影响PCR效果的前提下更快获得结果，节约科研时间和能源。

产品特点：
●  高灵敏的抗体修饰聚合酶，反应时间缩短一半
●  H-Competitor因子竞争氢键，特别应对高GC模板、复杂二级结构模板和长片段模板
●  EP组分稳定PCR体系，有效的保护酶活，抵御各种抑制剂的干扰
●  无色透明管代替棕色管，小改动蕴含大智慧

下游应用

适用于在各类荧光定量仪器上采用SYBR Green 法进行表达分析及核酸检测等类型实验，尤其适合高GC、复杂二级结构、杂质残留量高及长片段模板定量时使用。

实验例：

图1. 使用TIANGEN Talent qPCR PreMix（FP209，左）及国外A 公司（中）、B 公司（右）的同类产品定量人类UH11 基因（GC：73.4%），展示扩增曲线、熔解曲线和标准曲线。DNA 使用量分别为20 ng，2 ng，200 pg，20 pg，2 pg。结果显示，与竞品相比TIANGEN FP209对于5个浓度梯度定量清晰，Ct 值靠前，熔解曲线峰型正常，标准曲线相关系数高。TIANGEN FP209 对高GC 模板具有良好的适应性和扩增效率。

图2. 使用TIANGEN Talent qPCR PreMix（FP209，左）及国外A 公司（中）、B 公司（右）的同类产品定量人类H2 基因，模板为使用TIANGEN KG203 粗提的人类293T 细胞系的基因组DNA（具有较多杂质），展示扩增曲线和熔解曲线。展示扩增曲线和熔解曲线。结果显示，与竞品相比TIANGEN FP209 定量Ct 值靠前，熔解曲线峰型正常。TIANGEN FP209 对杂质含量高的模板具有优秀的抵抗力，保持较高的扩增效率。

图3. a：FP209（左）与FP205（右）包装管对比。使用无色透明管包装可以清楚看到管内剩余试剂量以及是否融化完全。b. 分别使用-20℃避光保存的FP209（左）与室温光照放置10 小时的FP209（右），定量不同起始浓度的人类H2 基因，展示扩增曲线、熔解曲线和Ct 值（U.D.:Undetected）。结果显示，两组结果无明显差异，光照对定量结果无影响，使用无色透明管包装不会影响产品质量。

1. 2 × Talent qPCR PreMix采用了抗体修饰的Anti Taq DNA聚合酶，配合特制的快速qPCR Buffer体系，可大大缩短变性、退火与延伸时间，可节省多达50%的反应时间，快速获得 实验结果。

 2. 本产品中特别添加了H-Competitor因子，能够竞争氢键、增强双链的打开强度，使本产品具 有广泛的样本普适性，对具有复杂高级结构的模板和长片段扩增等具有非常好的适用性。

 3. 本产品特制的快速PCR Buffer体系含有独特的PCR稳定因子——EP，能够有效的保护酶 活，抵御各种PCR抑制剂的干扰，保证了2 × Talent qPCR PreMix高扩增效率，高扩增 特异性、高扩增灵敏度和宽广的可信范围的特点。

 4. 2 × Talent qPCR PreMix中预混有SYBR Green I，PCR反应液配制时，只需加入模板、 引物、灭菌蒸馏水便可进行快速Real-Time PCR反应，操作简单方便。

 5. 本产品附带ROX Reference Dye，用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号 误差，方便客户针对不同型号荧光定量PCR仪时选择对应浓度使用。 

6. 2 × Talent qPCR PreMix采用无色透明管包装，经检测，光照不会影响体系的定量的结果。 

试剂盒原理 

本产品采用了特异的抗体修饰热启动DNA聚合酶进行快速PCR扩增，通过检测反应进程中 SYBR Green I 的荧光强度，达到检测PCR产物扩增量的目的，适用于标准和快速PCR仪。

 1. 本产品中特异的抗体修饰热启动DNA聚合酶，95℃条件下孵育3 min即可激活全部酶活， 在缩短变性时间的同时避免了非特异性产物的扩增，可大大缩短变性、退火和延伸时 间，使PCR总运行时间缩短50%，更快获得实验结果，而不影响PCR反应效果。

 2. 本产品的快速PCR Buffer体系添加了独特的H-Competitor因子和EP组分，配合精心优化 的快速PCR Buffer体系，对具有复杂高级结构的模板、PCR抑制剂残留较多的模板以及 长片段扩增等具有非常好的适用性。

 3. 本产品针对cDNA模板和gDNA模板结构组成的差异，对PCR的体系反应步骤进行了特别 的优化，使较难扩增的gDNA模板也能获得良好的PCR结果。

 注意事项

 1．如果试剂没有混匀，其反应性能会有所下降。使用时请上下颠倒轻轻混匀，请不要使用 振荡器进行混匀，尽量避免出现泡沫，并经瞬时离心后使用。

 2．引物纯度对反应特异性影响很大，建议使用PAGE级别以上纯化的引物。 

3．引物终浓度为0.3 μM可以在大多数体系中获得良好的扩增结果。如果需要进一步优化， 可以在 0.2-0.5 μM范围内调整引物浓度。 

4．20 μl反应体系中，cDNA模板的使用量一般小于100 ng，基因组DNA模板量一般小于50 ng，逆 转录产物作为模板时，使用量应不超过PCR体系终体积的20%。