苏州阿尔法生物实验器材有限公司

开启PSC培养的新维度Gibco StemScale™ PSC悬浮培养基是一种可扩展、易于使用的培养基,支持在悬浮培养中大规模生成人多能干细胞(PSC)。

1.扩增能力—每次传代可实现5-10倍扩增

2.细胞扩增能力超出其他市售PSC悬浮培养基系统3倍以上 

3.简化的工作流程—提供简单的培养基更换方案,

4.无需在培养或传代过程中使用微载体或细胞滤网

 5.多种形式的可扩展性—支持将PSC培养

6.规模扩大至多种容器形式:多孔板、摇瓶和生物反应器

7.PSC细胞系间的一致性—在保持多能性和细胞活力的同时实现可靠且一致的球状体形成

● 产品介绍/ product introductio

StemScale PSC悬浮培养基

产品信息

干细胞培养

Gibco StemScale™ PSC悬浮培养基是一种可扩展、易于使用的培养基,支持在悬浮培养中大规模生成人多能干细胞(PSC)。该款培养基经过专门配制,可解决当前PSC球 状体培养系统在聚集方面的技术挑战。

● 产品特点characteristics

图片3扩增能力强 —每次传代可实现5-10倍扩增,细胞扩增能力超出其他市售PSC悬浮培养基系统3倍以上
 

图片3简化的工作流程—提供简单的培养基更换方案,无需在培养或传代过程中使用微载体或细胞滤网
图片3多种形式的可扩展性—支持将PSC培养规模扩大至多种容器形式:多孔板、摇瓶和生物反应器

图片3PSC细胞系间的一致性—在保持多能性和细胞活力的同时实现可靠且一致的球状体形成

● 实验效果result

扩增能力强

Gibco StemScale PSC悬浮培养基通过球状体的自聚集进而支持悬浮多能干细胞的生长,非常适合需要大量高质量PSC的应用。

StemScale培养基每次传代可实现5-10倍扩增,细胞扩增能力超出其他培养基3倍(图1)。

Scaling expansion using StemScale Medium

图1.使用StemScale培养基进行大规模扩增。在30次传代和20周培养中,StemScale培养基每次传代均可实现10倍以上的细胞扩增(左图)。与其他供应商的培养基“M”相比,StemScale培养基可在同一时间段内实现高达3倍的扩增(右图)。

StemScale medium helps to maintain cell viability and pluripotency

图2.StemScale培养基有助于维持细胞活性和多能性。与其他悬浮培养系统相比,StemScale培养基可在传代3次后提供优越的细胞活性,并且在传代30次后仍可维持高多能性。

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在更短时间内生成更多细胞

与贴壁培养相比,在StemScale悬浮培养基中培养PSC球状体允许用户在更短的时间内培养更多数量的细胞(表1),同时减少培养基和塑料耗材的消耗量。

从6孔板的单个孔开始,相比贴壁培养,在悬浮培养中生长的细胞在时间和细胞数量方面显示出明显差异。

  悬浮大规模培养 贴壁大规模培养
总培养天数 培养容器形式 平均细胞产量 培养基消耗量 培养容器形式 平均细胞产量* 培养基消耗量
3天 6孔板(单孔) 1.5 x 106 个细胞 6 mL 6孔板(单孔) 1.5 x 106 个细胞 6 mL
7天 6孔板(全板) 18 x 106 个细胞 30 mL 100 mm 培养皿 9 x 106 个细胞 48 mL
11天 100 mL 生物反应器 150 x 106 个细胞 200 mL 150 mm 培养皿 22 x 106 个细胞 72 mL
15天 500 mL 生物反应器 750 x 106 个细胞 1,000 mL 经处理的Nunc TripleFlask细胞培养瓶 78 x 106 个细胞 800 mL
19天 3 L 生物反应器 4.5 x 109 个细胞 6,000 mL 2层Nunc Cell Factory系统 300 x 106 个细胞 1,200 mL
23天 10层Nunc Cell Factory系统 1.5 x 109 个细胞 6,000 mL
27天 30层Nunc Cell Factory系统 4.5 x 109 个细胞 18,000 mL
*该值根据每种培养容器形式的4天扩增数据估计得出。3 L生物反应器和30层Thermo Scientific Nunc Cell Factory系统的值根据表中列出的较小生物反应器和Nunc Cell Factory系统形式推断得出。


表1.悬浮培养系统与贴壁培养系统的大规模培养。悬浮培养系统(使用StemScale PSC悬浮培养基)与贴壁培养系统的大规模培养。

Pluripotent stem cells grown in StemScale PSC Suspension medium

图3.在StemScale培养基中生长的多能干细胞。在StemScale PSC悬浮培养基中接种的多能干细胞可在5天内维持最佳球状体大小和活性。

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“StemScale培养基能够改善干细胞球状体形成的效率。”
—— S. Rieck,ViaCyte

简化的工作流程


使用StemScale培养基可轻松使贴壁培养适应到悬浮培养。StemScale培养基允许用户采用隔日换液的时间方案(如需要)。在StemScale培养基中开始培养后,通过更换50%的培养基以定期每天或隔天一次饲养Gibco游离型iPSC。

Chart showing similar fold PSC expansion in StemScale medium with every day and every other day feeding.
Chart shows high percent pluripotency marker expression with flexible feeding in StemScale medium
 

图5.隔日饲养的培养物在倍数变化(A)和多能性(B)方面与每日饲养的培养物相似。














跨细胞系和不同培养容器形式的扩增能力

对于在StemScale培养基中培养的4种不同的PSC系,每次传代均可实现6-11倍扩增,且在15天内可扩增18-28倍。

Scale-up in suspension culture systems using StemScale PSC Suspension Medium vs. scale-up in adherent culture systems

图6.悬浮培养系统与贴壁培养系统。悬浮培养系统(使用StemScale PSC悬浮培养基)与贴壁培养系统的大规模培养。

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PSC球状体的神经和心脏分化

从StemScale PSC悬浮培养基培养的PSC球状体直接开始神经诱导

Neural induction of spheroids

图7.球状体的神经诱导。使用PSC神经诱导培养基(货号A1647801),直接从StemScale培养基培养的PSC球状体中诱导大量成熟的神经干细胞。

将StemScale培养的球状体引入DA神经元分化工作流程

Dopaminergic neurons are directly initated from PSC spheroids cultured in StemScale medium

图8.直接从StemScale培养基培养的PSC球状体中诱导多巴胺能神经元。与35天的贴壁培养方案相比,在悬浮培养25天时使用PSC多巴胺能神经元(DA)分化试剂盒(货号A3147701)从StemScale培养基中分化的DA神经元共表达的FOXA2/Otx2数量相同(数据未显示)。

PSC球状体的心脏类器官分化

Cardiomycytes differentiated in suspension from PSC spheroids grown in StemScale medium

图9.在StemScale培养基中生长的悬浮PSC球状体分化为心肌细胞。(A)诱导形成心脏前,在StemScale培养基中生长的未分化的hPSC球体形态。(B)心脏诱导开始12天的球状体。(C)用心脏标记物α横纹肌肌动蛋白(绿色)和心肌肌钙蛋白T(红色)染色心脏类器官。细胞核用DAPI(蓝色)复染。


● 规格参数  / SPECIFICATION 

货号 产品名称 规格 单价 (CNY)
A4965001 StemScale™ PSC Suspension Medium 1 L 8340
其他推荐的试剂、耗材和设备
货号 产品名称 规格 单价 (CNY)
A18945 人附着体诱导多能干细胞系 1 x 106 cells⁄vial 17542
A1110501 StemPro™ Accutase™ 细胞解离试剂 100 mL 796
A1647801 PSC 神经诱导培养基 500 mL 7478
A3147701 PSC Dopaminergic Neuron Differentiation Kit 1 kit 38412
A2921201 PSC 心肌细胞分化试剂盒 1 kit 8038
A3695201 B-27™ Supplement, XenoFree, minus insulin 10 mL 3431
150239 Nunc™ 未经表面处理的多孔细胞培养板 Case of 75 1731
4115-0125 125mL Erlynmeyer (Shaker) Flask, Single-Use PETG, Plain Bottom, Filter Cap, Pack of 1 Case of 24 1936