干细胞成骨诱导分化试剂-成人骨髓间充质干细胞

中文名称：成人骨髓间充质干细胞成骨诱导分化试剂盒 

英文名称：Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Osteogenic Differentiation Kit

货号：BMHX-D101 

规格：200 mL/Kit

质检标准 pH：7.2~7.4 

内毒素含量：＜10 EU/mL 

生物安全：细菌、真菌、支原体检测阴性

质量检测：诱导测试合格

运输方式：产品冰袋冷藏运输

 产品描述：

干细胞成骨诱导分化试剂是海星生物专为成人骨髓间充质干细胞研制优化的HyCyteTM成骨诱导分化培养基试 剂盒，用于增强成人骨髓间充质干细胞向成骨细 胞方向诱导分化的能力。在库产品均通过生物安 全检测和产品质量检测，体系稳定有效，现货供应，性价比高。

 | 检验原理 

茜素红是一种广泛应用于生物医学样本检 验的示钙染剂，游离的钙离子不能与茜素红形成 红色沉淀，而固化的钙质结节则能被染成红色。 干细胞在诱导培养基作用下，会逐渐向骨细胞方 向分化，产生明显的泌钙反应，形成钙盐结晶或 钙质结节，均能被茜素红染色。

 干细胞成骨诱导分化试剂使用说明：

1. 成骨诱导分化操作 

1.1 明胶包被培养器皿 干细胞培养较长时间后，可能会出现脱壁卷 边或漂浮现象，建议使用0.1%明胶溶液对培养器 皿进行包被。准备合适的培养器皿，取适量明胶 覆盖底面，37°C静置30 min，吸取晾干即可使用。

 1.2 接种干细胞 取对数生长期的细胞， 按 照 2.0×10e4 cells/cm2 的细胞密度接种至包被后的培养器皿中， 于 37℃，5% CO2 培养环境下培养至汇合度 60~70%，弃掉上清，加入成骨诱导分化培养基。

 1.3 细胞分化诱导 于37℃，5% CO2培养环境下培养约14~21天， 每2~3天换液一次，并注意观察细胞形态变化。 根据细胞钙盐结晶析出和钙质结节形成的情况， 决定终止细胞诱导的时间，并进行染色鉴定。 

2. 染色鉴定

 2.1 细胞固定 吸去培养基使用适量1×PBS清洗一次，弃去 后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面，室 温固定30~60 min，弃去固定液再使用1×PBS清洗 两次。 

2.2 茜素红染色 加入适量茜素红染色液染3~5 min，吸走茜 素红染色液，用1×PBS清洗两次，并加入适量1× PBS避免细胞干燥。 

2.3 诱导评估 显微镜下观察成骨染色效果，并进行图像采 集和诱导评估。诱导成功时，钙质结节与茜素红 染料结合后呈现红色或橘红色。 NOTE: 干细胞的成骨分化水平因细胞类型、细胞供体来 源，培养条件、细胞代次、细胞状态和分化时间等因素而异。

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