ApaLI内切酶
ApaLI内切酶(ApaLI restriction enzyme)是一种常用的限制性内切酶,属于Ⅱ型内切酶家族。ApaLI内切酶能够识别并切割DNA中特定的核苷酸序列,具有特定的切割位置和特异性。本文将对ApaLI内切酶的基本特性、作用机制、应用领域等方面进行详细介绍。
ApaLI内切酶的基本特性:
ApaLI内切酶主要识别并切割DNA中的5'-GTGCAC-3'序列,切位为该序列的ApaLI酶切位点。该酶切位点的特异性使ApaLI内切酶在DNA分子中具有高度特异性,能够精确切割含有特定序列的DNA片段。ApaLI内切酶的活性受到环境因素(如pH值、离子浓度等)的影响,因此在实验操作中需要注意调节适宜的反应条件。
ApaLI内切酶的作用机制:
ApaLI内切酶是一种双链DNA内切酶,通过识别特定的核苷酸序列,在该序列的特定位置引发DNA链的切割反应。ApaLI内切酶在酶切位点周围与DNA分子形成复合物,通过水解作用将DNA链切断,产生两个具有粘性末端的DNA片段。这些粘性末端可用于DNA片段的连接、重组等进一步实验操作。
ApaLI内切酶的应用领域:
ApaLI内切酶在分子生物学领域广泛应用于DNA片段的切割、重组、连接等实验操作中。通过ApaLI内切酶的作用,可以在DNA分子中特异性地切割出含有目标序列的片段,进而进行进一步的DNA克隆、测序、PCR等实验操作。ApaLI内切酶还常用于构建重组质粒、定向基因突变等研究领域,为研究人员提供了强大的工具和手段。
LightNing® 快速内切酶是一系列经过基因工程重组的快速限制性内切酶,适用于质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。所有 LightNing® 快速内切酶在通用的 CutOne® 或 CutOne® Color Buffer 中都具有优良的活性,能够在 5~15 分钟内完成酶切。此外,百时美去磷酸化、连接试剂在 CutOne® Buffer 中均具有 100% 活性,支持一管化反应,提升“酶切 - 修饰 - 连接”的体验。
CutOne® Color Buffer包括红色和黄色示踪染料,可将产物直接用于凝胶电泳。CutOne® Color Buffer 的红色染料与 2500 bp 双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近;黄色染料与 10 bp 双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近。