苏州阿尔法生物实验器材有限公司

产品货号: EG24520S

 产品规格: 100 rxns 

 同裂酶: BspTI, BfrI, BstAFI, MspCI, Vha464I 

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AflII内切酶-快切酶


产品货号: EG24520S

 产品规格: 100 rxns 

 试剂价格: ¥240 

 同裂酶: BspTI, BfrI, BstAFI, MspCI, Vha464I 

 识别位点: CTTAAG5'...C ↓ T T A A G...3'3'...G A A T T ↑ C...5'


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 LightNing® AflII内切酶是一系列经过基因工程重组的快速限制性内切酶,适用于质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。所有 LightNing® 快速内切酶在通用的 CutOne® 或 CutOne® Color Buffer 中都具有优良的活性,能够在 5~15 分钟内完成酶切。

LightNing® AflII内切酶组成

组分

规格

LightNing® AflII

100 μl

10× CutOne® Buffer

1 ml

10× CutOne® Color Buffer

1 ml





特性和用法:

LightNing® AflII内切酶 ,可在5~15 min内完成反应。

建议反应条件:

1× CutOne® 缓冲液;

37℃温育;参照DNA  快速酶切流程"配制反应体系。

失活条件:80℃温育20 min

存储条件:-20



分子生物学实验过程中可能遇到的常见问题及解决方案。
问题一:酶切反应时间过长
  • 问题描述:在进行 DNA 酶切实验时,使用的传统内切酶往往需要较长的反应时间,这不仅增加了实验的整体时长,还可能因为长时间的等待而影响实验进度。
  • 解决方案:LightNing® AflII 内切酶能够在 5 - 15 分钟内完成酶切反应,大大缩短了酶切时间。相比传统内切酶,它可以显著提高实验效率,让实验者能够更快地得到酶切结果,从而加快整个实验进程。
问题二:缓冲液选择困难
  • 问题描述:不同的内切酶可能需要不同的缓冲液,这使得在实验中选择合适的缓冲液变得复杂。如果选择不当,可能会影响酶切效果,甚至导致实验失败。
  • 解决方案:LightNing® AflII 内切酶在通用的 CutOne® 或 CutOne® Color Buffer 中都具有优良的活性。这意味着实验者无需为该内切酶专门寻找特定的缓冲液,减少了缓冲液选择的困扰,提高了实验的便利性和可操作性。
问题三:酶切反应条件难以控制
  • 问题描述:准确控制酶切反应条件对于获得良好的酶切效果至关重要。然而,不同的内切酶可能需要不同的温度、缓冲液浓度等条件,这使得实验者在设置反应条件时需要格外小心,稍有不慎就可能导致实验失败。
  • 解决方案:LightNing® AflII 内切酶的建议反应条件明确,在 1× CutOne® 缓冲液中,37℃温育,并且参照 “DNA 快速酶切流程” 配制反应体系。这样清晰的反应条件使得实验者能够更容易地控制实验过程,提高实验的成功率。
问题四:内切酶失活不彻底
  • 问题描述:在实验过程中,内切酶的失活不彻底可能会导致后续实验受到干扰。例如,在进行连接反应时,如果内切酶没有完全失活,可能会继续切割连接后的 DNA,从而影响实验结果。
  • 解决方案:LightNing® AflII 内切酶可以通过 80℃温育 20 分钟来实现失活。这种明确的失活条件可以确保内切酶在实验结束后能够被彻底失活,避免对后续实验产生不良影响。
问题五:酶切效果不稳定
  • 问题描述:有些内切酶在不同的实验条件下可能会表现出不稳定的酶切效果,这使得实验结果难以重复。实验者可能需要花费大量的时间和精力来优化实验条件,以获得稳定的酶切效果。
  • 解决方案:LightNing® AflII 内切酶在通用的缓冲液中具有优良的活性,并且反应时间短、失活条件明确,这些特点有助于提高酶切效果的稳定性。实验者可以更容易地掌握该内切酶的使用方法,从而获得更可靠的实验结果。
问题六:存储条件苛刻
  • 问题描述:一些内切酶可能需要特殊的存储条件,如低温、特定的缓冲液等。这不仅增加了存储成本,还可能在存储过程中出现问题,影响内切酶的活性。
  • 解决方案:LightNing® AflII 内切酶的存储条件为 -20℃,相对较为简单。实验者可以更容易地满足该内切酶的存储要求,确保内切酶在存储过程中保持良好的活性。