
天根质粒提取试剂盒是分子生物学实验室基础的高频耗材之一,用于从大肠杆菌培养液中分离、纯化质粒DNA。自1979年Birnboim & Doly提出碱裂解法以来,该技术已成为全球实验室提取质粒DNA的标准方法。现代质粒提取试剂盒普遍采用碱性裂解(Resuspension → Lysis → Neutralization)结合硅胶膜离心柱纯化的技术路线,整个操作流程可在30-90分钟内完成,无需酚氯仿抽提或乙醇沉淀,安全性与效率均大幅优于传统方法。
| 产品类型 | 培养体积 | 典型产量 | 内毒素水平 | 适用场景 |
|---|---|---|---|---|
| 质粒小提试剂盒(Miniprep) | 1-5 mL | ≤40 μg | ≤10 EU/μg | 常规克隆、PCR模板、酶切鉴定、转化 |
| 质粒中提试剂盒(Midiprep) | 25-100 mL | ≤400 μg | ≤1 EU/μg | 测序、体外转录、标记、中等规模酶切 |
| 质粒大提试剂盒(Maxiprep) | 100-500 mL | ≤1.5 mg | ≤0.1 EU/μg | 细胞转染、病毒包装、显微注射 |
| 质粒超大量提取(Megaprep/Gigaprep) | 500mL-5L | ≤15 mg | ≤0.1 EU/μg | 规模化生产、基因治疗、抗体/蛋白表达 |
| 无内毒素质粒提取试剂盒(EndoFree) | 依规格 | 依规格 | ≤0.01 EU/μg | 原代细胞/干细胞转染、体内实验、病毒载体 |
| 磁珠法质粒提取试剂盒 | 1-5 mL | ≤25 μg | ≤0.1 EU/μg | 自动化高通量提取、96孔板操作 |
| 通用型质粒提取试剂盒(EndA⁺适用) | 依规格 | 依规格 | ≤10 EU/μg | BL21(DE3)、TG1等EndA⁺菌株专用 |
天根试剂选择质粒提取试剂盒时需综合考虑三个核心维度:①提取规模——根据下游实验用量决定Miniprep/Midiprep/Maxiprep规格;②纯度要求——常规克隆选分子级(≤10 EU/μg),转染实验选转染级(≤0.1 EU/μg),敏感细胞或体内实验选超低内毒素级(≤0.01 EU/μg);③菌株类型——EndA⁺菌株(BL21、TG1等)需选用含专用EndA⁺洗涤缓冲液的通用型试剂盒,避免核酸酶污染导致质粒降解。对于高通量实验室,磁珠法试剂盒可兼容自动化平台。