为了确保HEK293细胞培养的稳定性和成功性,在使用HEK293细胞培养基时,需要注意以下事项。
培养液的配制
HEK293细胞培养应用两种培养液:DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium)和PMI(Power CHO Serum-Free Medium)。在配制培养液时要严格按照说明书来操作,遵循一定的配方和流程。此外,建议在配制时使用热处理的双倍溶液,这样能够避免配制中出现pH值过高或低的问题。
筛选培养基
在HEK293细胞培养基的筛选过程中,还需要考虑不同稳定性和适应性的培养基,以便更好地满足试验要求。例如,当进行大规模培养时,选择ProCHO5培养基,可以提高细胞的适应性和生长率。
培养环境的控制
HEK293细胞对培养环境的控制要求非常高。应该在合适的环境下培养,温度约为37℃,CO2浓度应为5%,无菌过滤技术也需得到保证。另外,在培养过程中为了防止细胞堆积,建议使用聚丙烯酰胺凝胶/滤器等工具来控制细胞的生长条件。
存储条件
当停止培养HEK293细胞时,需要对培养基的配制和富集物进行封存处理。应该使用-80℃低温存储,或N2液体氮存储。当需要重新开始培养时,应该使用稳定的细胞株以保证培养质量。
总之,对于HEK293细胞培养,合理规划培养基筛选、控制培养环境和注意培养操作的方法是保证HEK293细胞生长和稳定性的基础。这些注意事项,对于保证HEK293细胞的活力和保质期,都有非常积极的影响。
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