胰酶（Trypsin-EDTA 0.25%）（含酚红） 

     货号          规格         备注 

BDXB0020-1  100ml      1× 

保存温度：-20℃ 

   胰酶（Trypsin-EDTA）是常用的细胞分离试剂，为223个氨基酸组成的单链多肽，是胰蛋白酶原（Trypsinogen）在Lys6和Ile7之间切除氨基N末端6肽（Hexapeptide）得到的。胰 酶属于丝氨酸水解酶家族，活化位点包括His46和Ser183，胰酶裂解Lysine的羧基末端和 Arginine的氨基末端，水解效率在任何一端存在酸性氨基酸时降低，而当Proline存在于裂解 位点的羧基末端一侧时，水解反应不能发生。胰酶的使用pH值为7.2-9.2。

 成分 货号 BDXB0020-1 胰酶 0.25% EDTA·4Na 0.02g/L 酚红 N/A 

操作步骤 

注：使用前将胰酶解冻，保存在4℃，建议不要反复冻融。 

1. 移除细胞培养瓶/皿中的培养液，用适量不含钙和镁离子的PBS或D-PBS快速冲洗细胞 1-2次，完全移除培养瓶/皿中的液体；

 2. 加入适量（10cm培养皿加入0.5ml）胰酶，转动培养瓶/皿，让细胞和胰酶充分接触；

 3. 置于37℃培养箱中，孵育1-5min（不同细胞类型有所不同）； 

4. 轻轻磕击培养瓶/皿，在倒置显微镜下观察，大多数细胞荧光橙悬浮状态； 

5. 加入培养基，用移液管吹打5-10次，按照实验要求将细胞种植到新的培养瓶/皿中。 

注意事项 

1. 胰酶对细胞有损伤，应尽量缩短孵育时间；

 2. 如果细胞培养在不含血清的培养基中，胰酶消化完毕，加入PBS，500×g离心10分钟， 移除PBS，将细胞重悬于所用的培养基中。

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