NK-92细胞-人恶性非霍奇金淋巴瘤的自然杀伤细胞

 货号：TCH-C292 

规格：1×10⁶cells/T25培养瓶

细胞名称：人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞

细胞别称：NK92; Natural Killer-92; NK-92.05; Neukoplast; aNK

细胞简称：NK-92

产品货号：TCH-C292

种属来源：人

组织来源：淋巴

疾病特征：恶性非霍奇金淋巴瘤

细胞形态：淋巴母细胞样

生长特性：悬浮生长

培养体系：α－MEM+12.5% FBS+12.5%HS+0.2mM肌醇+0.1mM 2-巯基乙醇+0.02mM叶酸+200U/mLIL-2+1%P/S

配套培养基货号：TCH-G292

 NK-92细胞是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株IL-2依赖型NK细胞株。NK-92细胞对很多恶性细胞有细胞毒性；铬释放试验显示它能杀死K562细胞和Daudi细胞。NK-92细胞(经过照射以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的体外免疫清扫而不危及血细胞的功能。NK-92细胞有以下特征：CD2、CD7、CD11a、CD28、CD45、CD54表面标记阳性；CD1、CD3、CD4、CD5、CD8、CD10、CD14、CD16、CD19、CD20、CD23、CD34和HLA-DR表面标记阴性。

传代比例：1:3-1:6，每2-3天换液一次

传代周期：48-72 h

培养条件：气相：95%空气+5%CO2，温度：37℃

冻存条件：60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO，液氮储存

质量检测：细菌、真菌、支原体检测均为阴性

NK-92细胞-人恶性非霍奇金淋巴瘤的自然杀伤细胞  培养要点

 1. NK92细胞为悬浮生长，大部分细胞聚集成团，少数细胞分散，并且细 胞间隙会有较多的死细胞和细胞碎片；

 2. NK92细胞对IL-2敏感。培养基中IL-2降解，将导致细胞状态变差。IL-2 在-20℃解冻后置于4℃冰箱保存，4℃保存不应超过一周。配制好的新鲜培养基 要尽快用完，建议每次使用前拿出来预热，使用完毕后放回4℃冰箱保存；

 3. NK92细胞对离心敏感。正常培养时，换液周期为2~3天，建议交替使用 半量换液和离心换液法，即半量换液2~3次后，离心全量换液一次。尽量减少离 心次数，细胞状态不佳或细胞量少的时候，一般不建议离心； 

4. NK92细胞对机械力较敏感。正常培养时，应尽量避免吹打力道过大。 暴力吹打会使死细胞和细胞碎片增加。 

5. 正常培养时，NK 92细胞团的间隙有部分死细胞和细胞碎片是正常的， 如细胞碎片过多，可通过低速离心去除部分细胞碎片（800rpm,5min）。

 6. 血清质量差异可能引起细胞状态变化，建议选用高质量的胎牛血清。 

7. 细胞生长时，聚集的细胞团会逐渐增大，正常的细胞团在显微镜下呈现 白色透亮状。若细胞聚集太多，出现细胞团中部发暗时，可传代； 8. 细胞对培养液营养要求很高，在正常培养过程中应避免细胞团块太大， 这会导致营养不足；细胞团块过大时，需要稍微吹散，注意控制吹打次数，不需 刻意吹散成单个细胞。

 9. NK92的传代方法：将细胞团用移液器轻轻吹散，均分到两个瓶子里， 每瓶再补充等量培养基。 

10. NK92的冻存方法：细胞冻存的时候，细胞需要尽量分散，否则影响冻存效果。