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常见问答
分离和纯化蛋白-亲和层析法

      蛋白纯化介质主要应用于研究目的蛋白的结构、功用以及相互作用的和过程中。比如:在蛋白纯化过程中,由于亲和层析法的选择性和结合力较强,分辨率也高。所以,亲和层析法是一种常用的蛋白、抗体纯化方法,天地人和生物生产多种简单易用的亲和纯化介质,适用于批量或利用重力进行纯化,可以高效、便捷、可靠地从品中分离蛋白和抗体,为下游应用提供有力保证。

蛋白纯化

亲和层析法的原理

    亲和层析法是利用生物大分子与一些相应的特定分子之间的特异性识别和可逆结合的特点,分离生物大分子的一种方法。亲和层析是一种行之有效的蛋白质纯化方法,通常可以通过一步处理就能获得高纯度的蛋白质。蛋白质可以根据它们对特定配体的特异性而不是它们共价结合的能力来分离。  凝胶过滤层析法又称分子筛层析法,它是通过凝胶介质过滤的作用进行蛋白质分离和纯化,当样本流经葡聚糖凝胶介质或琼脂糖凝胶填料时,会根据样品的大小和形状对流经的蛋白进行分离,从而获得具有一定纯度的目的蛋白进行下游应用。

葡聚糖凝胶

   交联葡聚糖凝胶是葡聚糖通过环氧氯丙烷交联而成的球形凝胶。交联剂环氧氯丙烷的两个基团分别与两个葡聚糖残基上的游离羟基反应,使葡聚糖分子在分子内或分子间发生交联,形成网状结构的微球。葡聚糖是水溶性的,与葡聚糖凝胶交联,不溶于水,具有一定的抗压强度。可直接用于凝胶色谱。合成交联葡聚糖时,凝胶的交联度和目数由糖的浓度和交联剂的用量和反应条件决定,所以填料的抗压强度和排阻能力也是限定的。

      小葡聚糖凝胶(G-10、G-15、G-25、G-50)主要用于脱盐、多肽等小分子的分离。一般分子量在100万以上的大分子不能用葡聚糖凝胶,用琼脂糖凝胶,凝胶型号G后面的数字大致表示10g型凝胶有吸水值(ML)。

葡聚糖凝胶过滤介质主要有以下几种:

Smartdex G-10
Smartdex G-15
Smartdex G-25
PreCap Desalting
Prepacked Desalting Column
SpinDesalt Column
Smartdex G-50
Smartdex G-75
Smartdex G-100
Smartdex LH-20

琼脂糖凝胶

     琼脂糖是从海洋红藻中提取的天然高分子化合物,β-D-半乳糖与3,6-脱水-L-半乳糖交替连接。β- D-半乳糖和3,6-脱水-l-半乳糖之间的β(1→4)糖苷键,而3,6-脱水-L-半乳糖和β-D-半乳糖之间的α(1→3)糖苷键键连接。琼脂糖在室温下是固体。加热到45度以上时溶于水。当热的琼脂糖溶液(糖浓度为2%~16%)冷却后,链状分子之间形成双螺旋,进一步自发聚集成束状结构,形成多孔的三维网络琼脂糖凝胶。

      凝胶的平均孔径随糖溶液的浓度而变化,糖浓度大,凝胶的平均孔径小。高流量琼脂糖凝胶可承受高达0.3~0.4MPa的压力,基本满足大规模蛋白纯化分离的需要。

琼脂糖凝胶过滤介质主要包含以下几种:

Smartarose 4B
Smartarose 6B
Smartarose CL-4B
Smartarose CL-6B
Smartarose 4FF
Smartarose 6FF

Smac Beads

        苏州阿尔法生物提供的琼脂糖凝胶介质、葡聚糖凝胶介质等蛋白纯化 和分离填料以及相关生物试剂。另外还提供、组氨酸标签蛋白亲和纯化介质、GST-tag蛋白亲和纯化介质、 MBP-tag蛋白亲和纯化介质、生物素Biotin-tag蛋白亲和纯化介质、Strep-tagll标签亲和纯化介质、 标签抗体亲和纯化介质等标签蛋白亲和层析介质;离子交换层析介质、疏水层析介质、 磁性微球等。0512-62956104或18934597460.