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多道移液器进行移液操作时的注意事项
来源: 时间:2021-07-16

标签多道移液器 移液器 科普 亿康基因

亿康基因所生产的单细胞全基因组扩增试剂盒YK001A/B )常被用于单细胞基因组PCR实验。基因扩增实验中,使用移液器、 多道移液器进行实验时需要注意以下几点:

一、充分的实验准备

在基因扩增实验时,需要保证样品区及PCR实验室的洁净度,以避免样本的DNA污染,并提前预备 好实验所需要的仪器及材料,包括 移液器、吸头、多道移液器、PCR 管、离心管、离心管盒、PCR仪 、混匀仪、DNA清除剂、低温冰箱等;

二、对照样本的准备

按照实验说明要求提前设置 5 μL 左右浓度为 30pg/  μL的基因组 DNA 作为阳性对照参考。注意稀释DNA样本时要使用去RNA酶的水。另外,对照品制作过程中,需要保证对照品的准确度,由于操作的体积较小,必要时可使用微量移液器进行操作。如需同时设置多个样本,为避免重复操作过程中的也可以使用多道移液器 进行移液操作。移液之前做好校准工作,这样可有效提高移液的准确度。

三、PCR 扩增过程

PCR扩增过程中注意将 DNA 扩增产物与预扩增样本 分开放置;PCR以外的下游工程实验容易造成核酸污染所以尽量不要在PCR实验室中混用。样本准备区、核酸提取室、PCR室、检测区、数据分析区严格按规定独立使用以避免交叉污染。对于 单细胞全基因组扩增需要保持整个扩增过程都在同一 个PCR管或孔中进行 。使用移液器吸液操作时尽量避免移液器吸头过多接触液体,造成样本体积损失从而影响实验的准确性。利用多道移液器 进行吸液时需要保证液面平齐。

实验步骤为:细胞裂解---MALBAC 预扩增---指数式扩增---扩增产物分析----数据报告等五个阶段。


基因扩增

总之,在单细胞全基因组扩增实验及其它PCR实验中,防止DNA及RNA污染是实验成功的关键。实验的每个环节中的防污染的细节我们都不可以忽略,所以,实验前注重加强实验操作员的操作培训,养成严谨、认真的实验态度也是很有必要的。

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